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簡要描述:三線鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書上海帛科生物相關產(chǎn)品:無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)ACHN(人腎細胞)5×106cells/瓶×2S-180(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
三線鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書 | Fusarium tricinctumPCR | BK-P9196 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
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實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
蟾靈;Bufalin CAS 465-21-4 * 規(guī)格: 20mg
補骨脂二氫黃甲 ;Bavachini CAS 19879-30-2 * 規(guī)格: 20mg
白頭翁皂苷B4;Anemoside B4 CAS 129741-57-7 * 規(guī)格: 20mg
阿魏酸;Ferulic acid CAS 1135-24-6 * 規(guī)格: 50mg
磺草;純品型;標準品-甲磺草;有 CAS 104206-82-8 * 規(guī)格: 0.1g
藻醌;純品型;標準品;有證書 CAS 2797-51-5 * 規(guī)格: 0.1g
丙;純品型;標準品;有證書 CAS 51218-49-6 * 規(guī)格: 0.1g
丙森辛(異丙菌胺);純品型;標準品;有證 CAS 140923-17-7 * 規(guī)格: 0.1g
瘟靈;純品型;標準品;有證書 CAS 50512-35-1 * 規(guī)格: 0.1g
避蚊酯(鄰苯二二甲酯);純品型;標準 CAS 131-11-3 * 規(guī)格: 0.1g
烯丙;純品型;標準品;有證書 CAS 28434-00-6 * 規(guī)格: 0.1g
果;純品型;標準品;有證書 CAS 25954-13-6 * 規(guī)格: 0.1g
噻啉;純品型;標準品;有證書 CAS 111988-49-9 * 規(guī)格: 0.1g
梔子苷-對照品;有報告 CAS 24512-63-8 * 規(guī)格: 20mg
糖精鈉;純品型;標準品;有證書 CAS 82385-42-0 * 規(guī)格: 0.25g
三線鐮刀菌PCR檢測試劑盒說明書人神經(jīng)膠質(zhì)瘤細胞 U251
小鼠結(jié)腸細胞 CT-26 WT
細菌篩選培養(yǎng)基/Bacterium Screening MediumBR100克國產(chǎn)/進口
卵黃鈉瓊脂培養(yǎng)基/Egg-Yolk Salt Agar金黃色葡萄球菌的選擇性分離250克國產(chǎn)/進口
布氏菌選擇性培養(yǎng)基/Brucella Selective Medium布氏菌的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
CLED培養(yǎng)基/溴百里酚藍糖胱氨酸瓊脂/CLED Medium/BROLACIN Agar/Bromothymol-blue Lactose Cystine Agar/Cystine-Lactose-Electrolyte Deficient Agar尿液中微生物的選擇性分離培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進口
人椎間盤髓核細胞*培養(yǎng)基100mL
小鼠胰腺星狀細胞*培養(yǎng)基100mL
四硫磺酸鈉亮綠增菌液 規(guī)格: 2X5支 用途: 含碘液2ml/支和煌綠1ml/支,2支添加于100mL(023031)中配成TTB
SCDLP液體培養(yǎng)基 規(guī)格: 250g 用途: 用于疏水性化妝品樣品處理及化妝品和一次性使用衛(wèi)生用品增菌培養(yǎng)(化妝品衛(wèi)生規(guī)范微生物檢驗方法2...
Toll樣受體2(TLR2)重組蛋白 Recombinant Toll Like Receptor 2 (TLR2)
脯氨酸/絲氨酸豐富卷螺旋蛋白1(PSRC1)重組蛋白 Recombinant Proline/Serine Rich Coiled Coil protein 1 (PSRC1)
粒細胞巨噬細胞集落刺激因子(GMCSF)重組蛋白 Recombinant Colony Stimulating Factor 2, Granulocyte Macrophage (GMCSF)
無翅型MMTV整合位點家族成員3(WNT3)重組蛋白 Recombinant Wingless Type MMTV Integration Site Family, Member 3 (WNT3)
ACHN(人腎細胞)5×106cells/瓶×2
S-180(小鼠瘤細胞)5×106cells/瓶×2
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