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簡要描述:口蹄疫病毒通用PCR檢測試劑盒價格上海帛科生物相關產(chǎn)品:16B-, -17A, -1,4-, 21-, -3,20- two,, 370.44分子量: C22H28O5*:981-34-0乙酸鍶 214.71 Strontium acetate*:543-94-2分子量: C4H6O4Sr·1/2H2O
詳細介紹
技術原理:
DNA的半保留復制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動子的參與下,根據(jù)堿基互補配對原則復制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈式反應實驗中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈,當溫度降低后又可以復性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復性,并設計引物做啟動子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復制。( DNA高溫變性低溫復性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個循環(huán)加酶,使PCR技術變得非常簡捷、同時也大大降低了成本,PCR技術得以大量應用,并逐步應用于臨床。
注意事項:1.基礎程序;2.擴增溫度和延伸溫度;3.反應時間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應液的配制;6.PCR技術的基本原理;7.PCR的反應動力學;8.PCR擴增產(chǎn)物;9.PCR反應體系與反應條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號 |
口蹄疫病毒通用PCR檢測試劑盒價格 | FootandMouth Disease Virus(FMDV)RTPCR | BK-P9178 |
原理是由一對引物介導,能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進行快速酶促擴增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴增,擴增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴增效率=倍,使得檢測擴增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
?
實驗過程:
一、試劑準備
1. DNA模板
2.對應目的基因的特異引物(在PCR反應中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設計的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設計。因此,擴增不同的基因需要設計不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序將各成分加入一無菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調整好反應程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴增。一般:在93℃預變性3-5min,進入循環(huán)擴增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結束反應,PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測或-20℃長期保存。
4.PCR的電泳檢測:如在反應管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進行抽提反應混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測。
人顱蓋造骨細胞*培養(yǎng)基SK-CO-1(人結直腸腺細胞)
菜豆瘤菌 Rhizobium phaseoli綠木霉
光滑青霉釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
大鼠視網(wǎng)膜muller細胞100mL
人關節(jié)軟骨細胞*培養(yǎng)基100mL
蛛毒素受體3(LPHN3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Latrophilin 3 (LPHN3)
5%糖發(fā)酵管BR20支國產(chǎn)/進口
釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae無花果曲霉 Aspergillus ficuum
D/E中和瓊脂/D-E中性瓊脂/戴伊恩格利中和瓊脂/ D/E Neutralizing Agar衛(wèi)生環(huán)境中微生物的分離培養(yǎng), 消毒效果測定250克國產(chǎn)/進口
SMMC-7721(人肝細胞)臘狀芽胞桿菌 Bacillus cereus
透明質酸酶(含10mL酶解緩沖)1mL
口蹄疫病毒通用PCR檢測試劑盒價格甲磺酸鉀 134.2 Potassium methyl sulfonic acid*:2386-56-3分子量: CH3KO3S
(R)-3-甲酸甲酯酸 (R) -3- methyl piperidine hydrochloride*:分子量:
4-N-BOC- 200.28 Aminopiperidine 4-N-BOC-*:73874-95-0分子量: C10H20N2O2
1-溴-2,3,4,6-四氟 140.1118032 1- -2,3,4,6- four fluoro bromide*:1559-86-0分子量: C7H5FO2
9B,11B-環(huán)氧-16B-甲孕甾-1,4-二-17A,21-二-3,20-二酮 9B, 11B-, -16B-, -17A, -1,4-, 21-, -3,20- two,, 370.44分子量: C22H28O5*:981-34-0
乙酸鍶 214.71 Strontium acetate*:543-94-2分子量: C4H6O4Sr·1/2H2O
402有機擔體 402 organic body 分子量:*:
2--5-氯-3-甲吡 142.59 2- amino -5- -3-*:20712-16-7分子量: C6H7ClN2
4'-正丁-4-聯(lián)(4CB) 235.32 4'- butyl -4- cyano biphenyl (4CB)*:52709-83-8分子量: C17H17N
2-溴-5-甲醛噻唑 192.03 2- -5- bromine base thiazole formaldehyde*:464192-28-7分子量: C4H2BrNOS
N-甲磺酰氮丙 N- toluene, methyl chloride*:3634-89-7分子量: C9H11NO2S
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