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簡(jiǎn)要描述:猿皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:蠟蚧輪枝菌 Verticillum lecanii好食脈孢菌尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Plasminogen Activator, Urokinase (uPA)甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mannose Receptor C Type 1
詳細(xì)介紹
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
猿皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書 | Herpesvirus Simiae(HVS)PCR | BK-P9260 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
胱天蛋白酶3(CASP3)重組蛋白英文名稱:Recombinant Caspase 3 (CASP3)
THP-1(人髓系白血病單核細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
蠟蚧輪枝菌 Verticillum lecanii好食脈孢菌
尿激酶型纖溶酶原激活因子(uPA)重組蛋白英文名稱:Recombinant Plasminogen Activator, Urokinase (uPA)
甘露糖受體C1樣蛋白1(MRC1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Mannose Receptor C Type 1 Like Protein 1(MRC1)
體沙氏培養(yǎng)基/沙堡氏4%葡萄糖瓊脂肉湯/薩布羅氏葡萄糖瓊脂肉湯/SDB霉菌和酵母菌的增菌培養(yǎng)250克國產(chǎn)/進(jìn)口
凝結(jié)芽孢桿菌 Bacillus coagulans虎皮香菇,漏斗香菇 Lentinus tigrinus
甘露醇卵黃多粘菌素瓊脂基礎(chǔ)MYP 規(guī)格: 250g 用途: 用于蠟樣芽孢桿菌的菌數(shù)測(cè)定及分離培養(yǎng)(GB/T4789.28-2003中4.64,GB/T4789.14-2003,SN0176-92和...
美濃鏈霉菌 Streptomyces minoensis人腸動(dòng)脈內(nèi)皮細(xì)胞*培養(yǎng)基
暫無 Pseudomonas dacunhae爪哇霉 Rhizopus javanicus
熱帶假絲酵母 Candida tropicalis大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
猿皰疹病毒PCR檢測(cè)試劑盒說明書2-(二環(huán)己膦)-3,6-二甲氧-2'-4'-6'-三-I-丙-11'-聯(lián) 536.77 2- (dicyclohexylphosphonium) -3,6- two -2'-4'-6'- three -I- methoxy propyl biphenyl -11'-*:1070663-78-3分子量: C35H53O2P
氟曲唑 346.37 Flutrimazole Mazuo*:119006-77-8分子量: C22H16F2N2
N-乙-N-(2-羥-3-磺丙)-3-鈉(TOOS) N- ethyl -3- (2- hydroxy -3-) -N- methyl aniline sodium (TOOS) 331.4分子量: C12H18NNaO4S·2H2O*:82692-93-1
4--3,5-二氯吡 163 4- two -3,5-*:22889-78-7分子量: C5H4Cl2N2
十六氟酞菁銅 863.93 十六氟酞菁銅*:14916-87-1分子量: C32CuF16N8
黨參炔苷 Lobetyolin 396.43152分子量:C20H28O8*:136085-37-5
3,5-二氯-2-羥磺鈉(DHBS) 3,5- two sodium chloride -2- (DHBS) 265.05分子量: Cl2C6H2(OH)SO3Na*:54970-72-8
新補(bǔ)骨脂異黃酮 Neobavaisoflavone 分子量:*:
秦皮素 Fraxetin 208.16752分子量:C10H8O5*:574-84-5
4,6-二氯-5-硝嘧 193.98 4,6- two -5- nitro group*:4316-93-2分子量: C4HCl2N3O2
硝酸鍶 211.63 Strontium nitrate*:10042-76-9分子量: Sr(NO3)2
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