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簡(jiǎn)要描述:人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測(cè)試劑盒廠家上海帛科生物相關(guān)產(chǎn)品:酪蛋白氨基酸/酪蛋白水解物/Casamino acidBR100/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口WORT湯/WORT Broth真菌和酵母菌的培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口7.5%鈉湯/7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
詳細(xì)介紹
原理是由一對(duì)引物介導(dǎo),能在動(dòng)植物體外對(duì)特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個(gè)熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測(cè)擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
注意事項(xiàng):1.基礎(chǔ)程序;2.?dāng)U增溫度和延伸溫度;3.反應(yīng)時(shí)間;4.循環(huán)次數(shù);5.PCR 反應(yīng)液的配制;6.PCR技術(shù)的基本原理;7.PCR的反應(yīng)動(dòng)力學(xué);8.PCR擴(kuò)增產(chǎn)物;9.PCR反應(yīng)體系與反應(yīng)條件。
產(chǎn)品名稱 | 英文名稱 | 貨號(hào) |
人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測(cè)試劑盒廠家 | Human Immunodeficiency Virus 1(HIV1)IRTPCR | BK-P9277 |
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實(shí)驗(yàn)過程:
一、試劑準(zhǔn)備
1. DNA模板
2.對(duì)應(yīng)目的基因的特異引物(在PCR反應(yīng)中,新合成的DNA是要接在一小段序列上才能繼續(xù)按照模板DNA復(fù)制,而不能從無(wú)到有,憑空合成。這一小段序列就是你所要有設(shè)計(jì)的引物??梢允荄NA也可以是RNA,一般20多bp,需要根據(jù)你的模板鏈設(shè)計(jì)。因此,擴(kuò)增不同的基因需要設(shè)計(jì)不同的引物)
3.10×PCR Buffer
4.2mM dNTPmix:含dATP、dCTP、dGTP、dTTP各2mM
5.Taq酶
二、操作步驟
1.在冰浴中,按以下次序?qū)⒏鞒煞旨尤胍粺o(wú)菌0.5ml離心管中。
10×PCR buffer 5μl
dNTP mixl 4μl
引物1(10pM) 2μl
引物2(10PM) 2μl
Taq酶(2U/μl) 1μl
DNA模板(50ng-1μg/μl) 1 μl
加ddH2O至 50 μl
視PCR儀有無(wú)熱蓋,不加或添加石蠟油。
2.調(diào)整好反應(yīng)程序。將上述混合液稍加離心,立即置PCR儀上,執(zhí)行擴(kuò)增。一般:在93℃預(yù)變性3-5min,進(jìn)入循環(huán)擴(kuò)增階段:93℃ 40s → 58℃ 30s → 72℃ 60s,循環(huán)30-35次,zui后在72℃ 保溫7min。
3.結(jié)束反應(yīng),PCR產(chǎn)物放置于4℃待電泳檢測(cè)或-20℃長(zhǎng)期保存。
4.PCR的電泳檢測(cè):如在反應(yīng)管中加有石蠟油,需用100μlLuFang進(jìn)行抽提反應(yīng)混合液,以除去石蠟油;否則,直接取5-10μl電泳檢測(cè)。
技術(shù)原理:
DNA的半保留復(fù)制是生物進(jìn)化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈,在DNA聚合酶與啟動(dòng)子的參與下,根據(jù)堿基互補(bǔ)配對(duì)原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。
在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實(shí)驗(yàn)中發(fā)現(xiàn),DNA在高溫時(shí)也可以發(fā)生變性解鏈,當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此,通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性,并設(shè)計(jì)引物做啟動(dòng)子,加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。( DNA高溫變性低溫復(fù)性)
發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對(duì)于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義,該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活,不需要每個(gè)循環(huán)加酶,使PCR技術(shù)變得非常簡(jiǎn)捷、同時(shí)也大大降低了成本,PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用,并逐步應(yīng)用于臨床。
BEL-7402(人肝細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
蘇木素染色規(guī)格:100ml
改良LETHEEN瓊脂基礎(chǔ)/LETHEEN Agar Base Modified妝品中微生物檢測(cè)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
醛固酮合酶(ALDOS)重組蛋白英文名稱:Recombinant Aldosterone Synthase (ALDOS)
蘇云金芽胞桿菌巴基斯坦亞種 Bacillus thuringiensis subsp. pakistani人胎盤滋養(yǎng)層細(xì)胞*培養(yǎng)基
Jurkat, Clone E6-1 (人急性T淋巴細(xì)胞白血病細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
綠色木霉 Trichoderma viride釀酒酵母 Saccharomyces cerevisiae
抗生素Ⅱ號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)/抗生素2號(hào)培養(yǎng)基(PH7.8-8.0)/Antibiotic Agar NO.2克林霉素、林可霉素等藥品的效價(jià)測(cè)定250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
牛浸膏/牛膏/小牛浸膏/牛抽提物/Meat extracts beefBR500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
鼠李糖桿菌 Lactobacillus rhamnosus大豆慢生瘤菌 Bradyrhizobium japonicum
低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白1(LRP1)重組蛋白英文名稱:Recombinant Low Density Lipoprotein Receptor Related Protein 1 (LRP1)
人免疫缺陷病毒型通用PCR檢測(cè)試劑盒廠家馬鈴薯葡萄糖水 規(guī)格: 250g 用途: 用于椰毒假單胞菌酵米面亞種的檢驗(yàn)。(GB)
B-淋巴細(xì)胞激活抗原B7-2(LAB7-2)重組蛋白 Recombinant B-Lymphocyte Activation Antigen B7-2 (LAB7-2)
促胰液素(SCT)重組蛋白 Recombinant Secretin (SCT)
極低密度脂蛋白受體(VLDLR)重組蛋白 Recombinant Very Low Density Lipoprotein Receptor (VLDLR)
視黃醇結(jié)合蛋白3(RBP3)重組蛋白 Recombinant Retinol Binding Protein 3, Interstitial (RBP3)
整合素β3(ITGβ3)重組蛋白 Recombinant Integrin Beta 3 (ITGb3)
Lec1(倉(cāng)鼠卵巢細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
BC3H1(小鼠腦瘤細(xì)胞)5×106cells/瓶×2
人低分化前胃細(xì)胞 BGC-823
Swiss albion小鼠胚胎成纖維細(xì)胞 3T6
大鼠腎上腺嗜鉻細(xì)胞瘤細(xì)胞(低分化) PC-12(低分化)
脫羧酶對(duì)照試驗(yàn)培養(yǎng)基/Decarboxylase Control Medium脫羧酶試驗(yàn)性對(duì)照(無(wú)氨基酸)5克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
酪蛋白氨基酸/酪蛋白水解物/Casamino acidBR100/500克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
WORT湯/WORT Broth真菌和酵母菌的培養(yǎng)250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
7.5%鈉湯/7.5% Sodium Chloride Broth金黃色葡萄球菌選擇性增菌250克國(guó)產(chǎn)/進(jìn)口
人神經(jīng)小膠質(zhì)細(xì)胞*培養(yǎng)基100mL
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