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簡(jiǎn)要描述:多聚半乳糖醛酸酶(PG)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:乙酰胺瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Acetamide Agar250克綠膿桿菌的選擇性分離培養(yǎng)SCDLP液體進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)SCDLP Broth Medium250克化妝品檢驗(yàn)中樣品制備、增菌假單胞菌屬選擇瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Cetrimide Agar250克用于綠膿桿菌的分離培養(yǎng)普通瓊脂斜面(PH8.0-8.2)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Common Nutrient Agar
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:多聚半乳糖醛酸酶(PG)測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/48樣
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S7018
產(chǎn)品分類:光合作用系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 多聚半乳糖醛酸酶(EC3.2.1.15)是一種細(xì)胞壁結(jié)合蛋白,可以催化果膠分子中α-(1,4)-聚半乳糖醛酸的裂解,參與果膠的降解,使細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)解體,導(dǎo)致果實(shí)軟化,與果實(shí)成熟、葉和花的脫落、病原物防御,細(xì)胞伸展發(fā)育以及木質(zhì)化有關(guān),在植物抗病性和食品貯藏保鮮領(lǐng)域具有較高的研究?jī)r(jià)值。 測(cè)定原理: 多聚半乳糖醛酸酶水解果膠酸生成半乳糖醛酸,具有還原性醛基,與DNS試劑反應(yīng)生成紅棕色物質(zhì),在540nm有特征吸收峰,測(cè)定540nm處吸光值變化可計(jì)算得多聚半乳糖醛酸酶活性。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器: 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板、恒溫水浴鍋。 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
5g 1- 萘胺 1-Naphthylamine -20℃保存
50T 氣單胞菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250 μg Fluo-3 AM(鈣離子熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
25mL Bovine Gamma Globulin Solution,1mg/mL Bovine Gamma Globulin Solution,1mg/mL 常溫保存
50次 柱式DNA膠回收試劑盒 Column DNABACK 常溫保存
2 ug PGL2-enhancer PGL2-enhancer 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
9號(hào) 250g
1瓶 Hela-GFP細(xì)胞株 Hela-GFP 低溫運(yùn)輸和保存
改良鹽緩沖液(PSB) Phosphate Buffered Saline 10ml*20支/包
50U Cre 重組 Cre Recombinase -20℃保存
250mL Sodium Phosphate Buffer(鈉緩沖液),0.5M,pH7.6 Sodium Phosphate Buffer,0.5M,pH7.6 常溫保存
多聚半乳糖醛酸酶(PG)測(cè)試盒微量法ENaCg/γENaC 上皮鈉離子通道蛋白γ抗體 規(guī)格: 0.2mlLFABP/FABP-1 肝臟型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-mouse IgG-Fc/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗小鼠IgG-Fc 規(guī)格: 0.1mlAMFR/Gp78/RNF45 環(huán)指蛋白45/自分泌運(yùn)動(dòng)因子受體抗體 規(guī)格: 0.2ml
ATGL 脂肪甘油三酯脂抗體 規(guī)格: 0.1mlRabbit Anti-rat IgM/PE PE標(biāo)記的兔抗大鼠IgM 規(guī)格: 0.1ml
CRLF2 胸基質(zhì)淋巴細(xì)胞生成素受體抗體 規(guī)格: 0.2mlCathepsin S 組織蛋白S抗體 規(guī)格: 0.2ml
FMRP/FMR1 脆性X智力低下蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlMCP1/CCL2 單核細(xì)胞趨化蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-HDAC8(Ser39) 磷酸化組蛋白去乙?;?抗體 規(guī)格: 0.1mlDAP-5/p97 死亡相關(guān)蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cyclin E2 周期素E2抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-human IgG F(ab')2/HRP 辣根過(guò)氧化物標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
SARS putative orflab polyprotein 抗體 規(guī)格: 0.2mlTIP30 TIP30蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
phospho-IKK gamma (Ser85) 磷酸化KB抑制蛋白激γ抗體 規(guī)格: 0.1mlNCKAP1 膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體 規(guī)格: 0.2ml
BMP5 骨形態(tài)發(fā)生蛋白5抗體 規(guī)格: 0.1mlATH III 抗凝3抗體 規(guī)格: 0.2ml
APC5 細(xì)胞分裂周期蛋白5抗體 規(guī)格: 0.2mlFAM98B FAM98B蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Endothelial lipase 內(nèi)皮脂肪抗體 規(guī)格: 0.2mlSAMD7 SAMD7蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
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