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乙醇酸氧化酶測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:乙醇酸氧化酶測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:胰大豆酵母浸膏瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)TSYEA250克用于單核 和李斯特氏菌的分離培養(yǎng)李氏菌增菌肉湯(LB1,LB2)基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Listeria Enrichment Broth Base250克李氏菌二步增菌PALCAM瓊脂進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)PALCAM Agar250克單增李氏菌的選擇性分離OXA基礎(chǔ)進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Oxford Agar Base250克單增李氏菌

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-24
  • 訪  問  量:645

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測(cè)定意義:

乙醇酸氧化酶(EC1.1.3.1)是植物光呼吸代謝中的關(guān)鍵酶,也是光下合成草酸的關(guān)鍵酶,它催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,對(duì)研究光呼吸代謝過程及其調(diào)控具有重要意義。

測(cè)定原理

乙醇酸氧化酶催化乙醇酸氧化生成乙醛酸,乙醛酸和鹽酸苯肼反應(yīng)生成乙醛酸苯腙,在324nm有特征吸收峰。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、低溫離心機(jī)、紫外分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、微量石英比色皿/96孔板。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

乙醇酸氧化酶測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S7003

11.png 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

0.2%可溶性淀粉的BCP脫脂奶粉平板計(jì)數(shù) BCP Medium with 0.2% Soluble Starch 250g

1瓶 NCI-H596細(xì)胞株 NCI-H596 低溫運(yùn)輸和保存

吐溫稀釋液 Lecithin polysorbate(LP)diluent 250g

25mg 刀豆蛋白 A IV  Con A Type IV -20℃保存

500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.2    Tris-HCl Buffer,1.0M,pH8.2    常溫保存

500次 BCA法蛋白定量試劑盒 BCA Protein Assay Kit 常溫保存,BSA標(biāo)準(zhǔn)需要-20℃保存

2 ug pTriEx 1.1 pTriEx 1.1 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

20000U S1核酸 S1 Nuclease -20℃保存

2 ug pED-GST-pp-air pED-GST-pp-air 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

改良克氏雙糖鐵管  5ml*20支

10g 3- 三 ( 羥甲基 ) 甲基 -3- 氨基丙烷磺酸 TAPS 密封干燥保存

乙醇酸氧化酶測(cè)試盒微量法Podoplanin Protein/gp36  平足蛋白抗體(淋巴管內(nèi)皮細(xì)胞蛋白) 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-chicken IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗雞IgG 規(guī)格: 0.1ml

PCMT1  天門冬甲基轉(zhuǎn)移PCMT抗體 規(guī)格: 0.2ml

Rabbit Anti-dog IgG/Alexa Fluor 647  Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗狗IgG 規(guī)格: 0.1ml

FAM84B/BCMP101  膜相關(guān)蛋白101抗體 規(guī)格: 0.2ml

PCANAP2/Prostein  前列相關(guān)蛋白2抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRAF6  瘤壞死因子受體相關(guān)因子6抗體 規(guī)格: 0.1mlphospho-Androgen Receptor (Ser212)  磷酸化雄激素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

ANKRD26  錨蛋白重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白26抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-PKA beta(Ser338)  磷酸化蛋白激Aβ抗體 規(guī)格: 0.1ml

RNF160/ZNF294  環(huán)指蛋白160抗體 規(guī)格: 0.2mlCCDC134  卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白134抗體 規(guī)格: 0.2ml

SEK1/MKK4  絲裂原活化蛋白激激4抗體 規(guī)格: 0.2mlWnt1  信號(hào)通路Wnt1抗體 規(guī)格: 0.1ml

Aspartate Aminotransferase  谷草轉(zhuǎn)氨抗體 規(guī)格: 0.2mlGoat Anti-human IgG/HRP  辣根過氧化物標(biāo)記的羊抗人IgG 規(guī)格: 0.1ml

TGF beta R2/TGFBR2  轉(zhuǎn)移生因子β受體2抗體(TGF-βRⅡ) 規(guī)格: 0.2mlCCNDBP1/GCIP  周期素D結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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