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簡(jiǎn)要描述:H2S含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:小牛血清進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Calf serum200毫升診斷試劑用標(biāo)準(zhǔn)胎牛血清進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Fetal bovine serum(Characterized FBS)200毫升BR優(yōu)級(jí)胎牛血清進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)Fetal bovine serum(Characterized FBS)100毫升BR進(jìn)口、國(guó)產(chǎn)500毫升
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注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通??梢允箿y(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:H2S含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測(cè)方法:可見(jiàn)分光光度法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6924
產(chǎn)品分類:信號(hào)系列
商品介紹:
測(cè)定意義: H2S是一種新型氣態(tài)信號(hào)分子,存在于腦內(nèi)的神經(jīng)遞質(zhì),生理濃度的H2S對(duì)神經(jīng)系統(tǒng)海馬的長(zhǎng)時(shí)程增強(qiáng)功能具有重要的調(diào)節(jié)作用,并對(duì)自發(fā)性高血壓、出血性休克及肝硬化等疾病的過(guò)程發(fā)揮著重要的病理生理效應(yīng)。 測(cè)定原理 H2S與醋酸鋅、N, N-二甲基對(duì)苯二胺和硫酸鐵銨等反應(yīng)生成亞甲基藍(lán),亞甲基藍(lán)在665nm處有最大吸收峰,通過(guò)測(cè)定其吸光值可計(jì)算H2S含量。 自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器 天平、低溫離心機(jī)、可見(jiàn)分光光度計(jì)、1 mL玻璃比色皿、蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
1瓶 MDBK細(xì)胞株 MDBK 低溫運(yùn)輸和保存
品紅亞瓊脂 Fuchsin Basic Sodium Sulfite Agar 250g
1mg 乙酰輔 A Acetyl Coenzyme A -20℃保存
500mL Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.8 Tris-HCl Buffer,1.0M,pH7.8 常溫保存
100µL 小鼠抗Flag標(biāo)簽單抗 Anti Flag-Tag Mouse MAb -20℃保存
2 ug pSwitch pSwitch 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL RNase-free 氯化鋰溶液,10M 常溫
2 ug pCW-Cas9 pCW-Cas9 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
0.83nmol 通用 miRNA 克隆接頭 Universal miRNA Cloning Linker -20℃保存
25g 核黃素
50T 胎兒彎曲菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
H2S含量測(cè)試盒可見(jiàn)分光光度法HCMV 人巨細(xì)胞毒抗體 規(guī)格: 0.1ml
UTP14A/SDCCAG16 結(jié)腸抗原16抗體 規(guī)格: 0.2ml
APG7/ATG7 自噬相關(guān)蛋白7抗體 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-human IgM/Alexa Fluor 488 Alexa Fluor 488標(biāo)記的小鼠抗人IgM 規(guī)格: 0.1ml
SCN2A SCN2A抗體 規(guī)格: 0.1ml
Hepatic lipase 肝脂抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-Bov IgG/Gold 膠體金標(biāo)記的兔抗牛IgG 規(guī)格: 0.5ml
C2CD4C/NLF3 限局性核因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD20 CD20抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 647 Alexa Fluor 647標(biāo)記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
Troponin T/c 心肌特異性肌鈣蛋白T抗體 規(guī)格: 0.1ml
BPGM 紅細(xì)胞2,3 - 二磷酸甘油酸合成抗體 規(guī)格: 0.2ml
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