簡要描述:土壤植酸酶測試盒微量法公司正在出售的產品:羊膽鹽進口、國產Bile salt from sheep25克BR牛膽鹽進口、國產Bile salt from ox25克BR,60%豬膽鹽進口、國產Bile salt from pig25克BR,65%禽膽鹽進口、國產Bile salt from poultry25克BR
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商品介紹:
測定意義: 植酸酶(phytase)是催化植酸及其鹽類水解為肌醇與磷酸(鹽)的一類酶的總稱,屬磷酸單酯水解酶,它能將食品和飼料中植酸及其鹽轉化為可供有機體利用的有效磷,降低糞便中的磷含量,減輕對環(huán)境的污染,改善營養(yǎng)成分的吸收和利用,因此具有極其廣泛的研究和應用價值。 測定原理 植酸酶在一定溫度和pH值條件下,水解底物植酸鈉生成無機磷與肌醇衍生物,無機磷在酸性環(huán)境中與鉬酸銨顯色劑反應生成藍色復合物,在700nm處有特征吸收峰,根據(jù)700nm處吸光值變化可計算得植酸酶活性。 自備實驗用品及儀器 天平、低溫離心機、可見分光光度計、1mL玻璃比色皿、恒溫水浴鍋,甲苯(不允許快遞)。 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結果,提供原始數(shù)據(jù)!
產品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
土壤植酸酶測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6921 |
實驗結果判斷我有妙招:
1、定量測定結果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應的物質要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應的物質要密封保存,其相應的溶液較固體更易反應,所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
素B(4ug) 1ml/支*5
1瓶 NB-4細胞株 NB-4 低溫運輸和保存
雙料乳糖膽鹽發(fā)酵 Double Lactose Bile Medium 250g
100g β- β-Amylase 4℃保存
1000mL Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt) Tris Buffered Saline(TBS),10X,low salt) 常溫保存
25mg 化的牛血清白蛋白 Biotin-BSA -20℃保存
2 ug pThio-His A pThio-His A 低溫運輸,-20℃保存
50支 B(尼龍頭) Uterus Swabs 常溫
2 ug pDsRed2-Express-N1 pDsRed2-Express-N1 低溫運輸,-20℃保存
D-環(huán)溶液 5ml*10
100g 檸檬酸鈉,二水 Sodium Citrate Dihydrate 室溫保存
土壤植酸酶測試盒微量法AIFM3 凋亡誘導因子3抗體 規(guī)格: 0.2ml
HCG/LH/FSH/TSH alpha 人絨毛膜促性激素α亞基抗體(Cg A) 規(guī)格: 0.1ml
CCL24 嗜酸粒細胞趨化蛋白24抗體 規(guī)格: 0.2ml
Goat Anti-rabbit IgG/FITC FITC標記的羊抗兔IgG 規(guī)格: 0.3ml
CK2 細胞角蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml
GLUT8 葡萄糖轉運蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-Zyxin (Ser142/Ser143) 磷酸化斑聯(lián)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
PFK2/PFKFB3 6磷酸果糖激2抗體 規(guī)格: 0.2ml
GABARAPL1 γ氨基丁酸受體相關蛋白樣1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Histone H2B 組蛋白H2B抗體 規(guī)格: 0.1ml
HSD11B1/HSD1 羥基類固醇脫11β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
DRD2 多巴胺受體D2抗體 規(guī)格: 0.1ml
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