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簡要描述:α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:1%NaCl甘露糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 氨基酸脫羧對照 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 1%NaCl蔗糖 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支 鳥脫羧肉湯 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:20支
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費(fèi)代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6747 |
商品介紹:
測定意義: α-GAL (EC 3.2.1.22)廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細(xì)胞中,能專一地催化α半乳糖苷鍵的水解,主要參與棉子糖、水蘇糖、蜜二糖和半乳甘露聚糖等半乳糖苷的降解。α-GAL對于植物種子的萌發(fā)至關(guān)重要,種子萌發(fā)初期,其催化產(chǎn)生的D-半乳糖通過糖酵解途徑迅速轉(zhuǎn)化和消耗,為種子的萌發(fā)提供最初的能量來源,后期則主要參與細(xì)胞壁儲藏多糖水解。 測定原理: α-GAL分解對-硝基苯-α-D-吡喃半乳糖苷生成對-硝基,后者在400nm有最大吸收峰,通過測定吸光值升高速率來計算α-GAL活性。 自備用品: 可見分光光度計/酶標(biāo)儀、臺式離心機(jī)、水浴鍋、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
100mL 三 TFA(Trifluoroacetic Acid) 室溫保存
Fraser(FB2)添加劑 Fraser Supplement 5ml*2
1 管 JM101大腸桿菌 JM101 E.coli Strain -80℃保存
2 ug pRSV-rev pRSV-rev 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
100mL 冷凍型血液RNA保存液 常溫
2 ug pcDNA3.1/Myc-His C pcDNA3.1/Myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
YM培養(yǎng)基 YM Medium 250g
500mL 甲醇 Methanol 室溫密封保存
50T 牛病毒性腹瀉病毒(BVDV)核酸檢測試劑盒(RT-PCR) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
1 mg BCECF AM Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
BETA-SSA瓊脂 BETA-SSA Agar 250g
α半乳糖苷酶(αGAL)測試盒微量法Rabbit Anti-Guinea pig IgG/Bio 標(biāo)記的兔抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1mlDOK3 對接蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
LRFN2/SALM1 神經(jīng)突觸粘附樣分子1抗體 規(guī)格: 0.2mlTHAP1 核凋亡因子THAP1抗體 規(guī)格: 0.2ml
NUDEL/NDEL1 中心粒蛋白Nudel抗體 規(guī)格: 0.2mlPDIA2/PDI 蛋白質(zhì)二硫鍵異構(gòu)抗體 規(guī)格: 0.2ml
PGRMC 孕激素受體膜相關(guān)元件抗體 規(guī)格: 0.2mlSCN10A/NAV1.8 鈉通道蛋白10α抗體 規(guī)格: 0.2ml
CD158e NK細(xì)胞抑制性受體3DL1抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit Anti-chicken IgM/Cy5.5 Cy5.5標(biāo)記的兔抗雞IgM 規(guī)格: 0.1ml
C10orf93 10號染色體開放閱讀框93抗體 規(guī)格: 0.2mlCAMK2D/CaMKII delta 鈣/鈣調(diào)素依賴蛋白激2D(CaMKIIδ) 規(guī)格: 0.2ml
EME1 減數(shù)分裂內(nèi)切EME1抗體 規(guī)格: 0.2mlCDC123/C10orf7 細(xì)胞分裂周期蛋白CDC123抗體 規(guī)格: 0.2ml
HSD3B1 滋養(yǎng)層細(xì)胞抗原3β-HSD抗體 規(guī)格: 0.1mlGlutamine PRPP amidotransferase 谷磷酸核糖基焦磷酸酰胺基轉(zhuǎn)移 規(guī)格: 0.2ml
PIWIL4 piwi樣4蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Histone H1 組蛋白H1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CXorf36 脫羧蛋白體36抗體 規(guī)格: 0.2ml
GFP 綠色熒光蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
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