儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或將板平放在底部墊有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現性好：變異系數CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

CD3E Others Cynomolgus 食蟹猴 CD3e / CD3 epsilon 人細胞裂解液 (陽性對照) 鹽酸曲普利啶（標準品）質量規(guī)格：含量測定Triprolidine

小鼠結腸平滑肌細胞*培養(yǎng)基 100mL米力農(標準品)質量規(guī)格：>98%,標準品Milrinone

Y1小鼠腎上腺皮質瘤細胞 Y1 mouse adrenocortical tumor cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS壬二酸（標準品）質量規(guī)格：檢查Azelaic acid

LEP Protein Human 重組人 Leptin 蛋白培哚普利雜質S9780（培哚普利拉）（標準品）質量規(guī)格：供HPLC法系統適用性試驗用Perindoprilat

SF17(人腦瘤細胞) 5×106cells/瓶×2 RT4(膀胱癌細胞)銀杏酸C15:1質量規(guī)格：HPLC≥80%，美國進口Ginkgolic Acid C15:1
CL-0397NCI-H23(人非小細胞肺癌細胞)5×106cells/瓶×2藍銅肽/甘氨酰-L-組氨酰-L-賴氨酸質量規(guī)格：>98.5%GHKcu/Growth-modulating peptide

人絨毛膜間充質基質細胞 Sars蛋白表達株，293001B細胞 NCI-H520 [H520](人肺癌細胞)氨苯蝶啶 質量規(guī)格：>98%,BRTriamterene

人前列腺癌高轉移細胞株;PC-3M IE8卡拉膠質量規(guī)格：粘度≥0.005 pa.sCarrageenan

BSG Others Mouse 小鼠 CD147 / EMMPRIN / Basigin 人細胞裂解液 (陽性對照) 普侖司特質量規(guī)格：≥98%,BRPranlukast

EB病毒轉化的人B細胞;KMY09031酸美托洛爾質量規(guī)格：>99%,BRMetoprolol tartrate
CM-R050大鼠卵巢顆粒細胞*培養(yǎng)基100mLS-本基，英文名或英文縮寫：L-Homopxenylalanine，級別：BR，98%，規(guī)格：1克

BGC-823細胞，人低分化胃癌細胞 人腦膠質母細胞瘤細胞,SW038-C2細胞 EB病毒轉化的絨猴細胞;B95-8膽紅素氧化酶 Bilirubin oxidase (15-65 units/mg) 80619-01-8 50UN 通用試劑

COLO 320(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2已醋醋-順式-3-己1酯 ≥98% FqMc 3403 31201-11-8

CD14 Others Human 人 CD14 人細胞裂解液 (陽性對照) 2-Amino-1-pxenylethanol2-基-1-本基乙醇5克BR，98%

人前列腺癌低轉移細胞株;PC-3M-2B427580-14-9固紅ITR鹽(+4℃)FAST RED SALT ITR
過氧化氫H2O2測試盒中國倉鼠卵巢細胞(亞系克隆);CHO-DUKXB11-TGF-β Dinding Protein cDNA泛酸鈣,維生素B5D-Calcium Panthotenate 質量規(guī)格：供HPLC法含量測定用

AR42J細胞，人胰腺細胞 人皮膚成纖維細胞系,BJ細胞 小鼠神經母細胞瘤細胞;Neuro-2a [N2a; Neuro-2a]鹽酸特拉唑嗪（標準品）Terazosin HCl質量規(guī)格：含量測定

HT-29(人結腸癌細胞) 5×106cells/瓶×2氯化鈉（標準品） chloride質量規(guī)格：含量測定

Gibco 17105041 中性蛋白酶Dispase II, powder 5 g氨力農（標準品）Amrinone質量規(guī)格：UV法含量測定

人膀胱平滑肌細胞裂解物HBdSMCL更昔洛韋（標準品）Ganciclovir質量規(guī)格：含量測定

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