儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結(jié)合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結(jié)果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

CL-0381MDA-MB-175VII(人導管癌細胞)5×106cells/瓶×2BOC-L-酪氨酸甲酯質(zhì)量規(guī)格：>99%,BRBoc-Tyr-OMe

LIPF Others Human 人 Gasic lipase / LIPF 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) N-叔丁氧羰基-O-(2-溴芐氧羰基)-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-O-(2-bromo-Cbz)-L-Tyrosine

人心肌細胞-心室總RNAHCF-av NABoc-O-叔丁基-L-酪氨酸質(zhì)量規(guī)格：>98%,BRBoc-O-tert-butyl-L-tyrosine

大耳山羊腎細胞;LDG-2 皮下結(jié)締組織細胞，A9細胞 CT26.WT[CT26WT]細胞，小鼠結(jié)腸癌細胞N-CBZ-beta-丙氨酸質(zhì)量規(guī)格：0.98Z-β-Ala-OH

人胚肺二倍體細胞;KMB-17CBZ-D-谷氨酸α-芐酯質(zhì)量規(guī)格：>98%Z-Glu-OBzl
FSTL3 Others Mouse 小鼠 FLRG 人細胞裂解液 (陽性對照) 偶氮胭脂紅B質(zhì)量規(guī)格：INDAzocarmine B

MLF, 小鼠成纖維細胞偶氮胭脂紅G質(zhì)量規(guī)格：BSAzocarmine G

KLRK1 Others Human 人 NKG2D / CD314 / KLRK1 CHO細胞裂解液 (陽性對照) 皮質(zhì)甾酮(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>97.0%,標準品Corticosterone

人成纖維細胞RNAHMF miRNA5 μg二硫化四乙基秋蘭姆質(zhì)量規(guī)格：>97%Disulfiram

兔源細胞 長鼻袋鼠腎細胞，Pt K1細胞 RBL-1細胞，大鼠嗜堿性粒細胞性白血病細胞雙硫侖(標準品)質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標準品Disulfiram
LAMP2 Others Cynomolgus 食蟹猴 LAMP2 人細胞裂解液 (陽性對照) 1-羥環(huán)己基苯酮(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)1-Hydroxycyclohexyl Phenyl Ketone

豚鼠胚胎細胞;104C1二苯基鎓六氟1酸鹽(>97.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>97.0%(T)Diphenyliodonium Hexafluorophosphate

AsPc-1細胞，人轉(zhuǎn)移胰腺癌細胞 人正常皮膚細胞,HaCaT細胞 小鼠T細胞;Cl.Ly1+2-/92-(4-甲氧苯基)-4,6-雙(三氯) -1,3,5-三嗪(>98.0%(GC))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)2-(4-Methoxyphenyl)-4,6-bis(trichloromethyl)-1,3,5-triazine

HSC-T6(大鼠肝星形細胞) 5×106cells/瓶×2三苯基溴化锍(>98.0%(T))質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(T)Triphenylsulfonium Bromide

Gibco 17101015 Collagenase Type II 1g2-溴咪唑并[1,2-a]吡嗪質(zhì)量規(guī)格：>98%6-Bromoimidazo[1,2-a]pyrazine
谷氨酸脫氫酶GDH測試盒J82(人膀胱癌細胞) 5×106cells/瓶×2 LncaP, 人前列腺癌細胞 人腦瘤細胞;SF763胡椒堿(標準品)Piperine質(zhì)量規(guī)格：HPLC≥98%，標準品

人胚胎眼鞏膜成纖維細胞;HFSF紐莫康定B0(肺囊康定) Pneumocandin B0質(zhì)量規(guī)格：>95%

STK40 Others Human 人 STK40 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 福莫特羅 Formoterol  質(zhì)量規(guī)格：>98%

CL-0274EJ(人膀胱癌細胞)5×106cells/瓶×2溴甲后馬托品Homatropine Methyl Bromide 質(zhì)量規(guī)格：BR，進口原裝

293T, SV40轉(zhuǎn)化的人胚腎上皮細胞系 小鼠原B細胞，BA/F3細胞 Hs 181.Tes(正常人細胞)乙酸阿比特龍酯Abiraterone Acetate質(zhì)量規(guī)格：>98%,細胞色素CYP17抑制劑

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