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簡要描述:肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:亞碲酸鉀血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Potassium Tellurite Blood Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 氣單胞菌鑒別瓊脂 英文名稱:Aeromonas Differential Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 改良羅氏培養(yǎng)基基礎(chǔ) 英文名稱:L-G medium Base,Modified 產(chǎn)品規(guī)格:250g 胰膘肉湯基礎(chǔ)
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商品介紹:
測定意義: 肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶是存在于線粒體內(nèi)膜的一類酰基轉(zhuǎn)移酶??赡娴卮呋瘡孽;鶎Ⅴ;D(zhuǎn)移至L-肉毒堿的反應(yīng),在轉(zhuǎn)運脂肪酸通過線粒體內(nèi)膜的過程中起重要作用。 測定原理: 基于肉堿和脂酰在丙二酰存在與否的條件下,通過肉堿脂酰轉(zhuǎn)移酶(CPT-I)的作用,產(chǎn)生脂酰肉堿,并釋放出巰基(COA-SH),與Ellman試劑DN-TB反應(yīng)后,產(chǎn)生黃色的TNB。通過其吸收峰值得變化(412nm),來定量分析CPT-1的活性。 需自備的儀器和用品: 可見分光光度計、臺式離心機、水浴鍋、可調(diào)式移液器、1mL玻璃比色皿、研缽、冰、無水乙醇和蒸餾水 |
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6669 |
實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
2 ug pN-YFP pN-YFP 低溫運輸,-20℃保存
DPD培養(yǎng)基 DPD Medium 250g
1瓶 TE-13細胞株 TE-13 低溫運輸和保存
去氧膽酸鹽枸櫞酸鹽瓊脂 Desoxycholate Citrate Agar 250g
10g 聚蔗糖 400 Ficoll PM400 室溫干燥保存
50T 副流感病毒Ⅱ型PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
100mL 增強型DAB顯色試劑盒 Enhanced DAB Chromogenic Kit 4℃保存
2 ug STAT1-lucifer STAT1-lucifer 低溫運輸,-20℃保存
1mL PCR抑制物清除劑 PCR Inhibitor Erasol 低溫運輸,-20℃保存
2 ug pAc5.1/V5-His B pAc5.1/V5-His B 低溫運輸,-20℃保存
沉降菌測試培養(yǎng)基
肉毒堿棕櫚酰轉(zhuǎn)移酶(CPT1)測試盒微量法Nestin 巢蛋白/神經(jīng)上皮干細胞蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
FAK2/PYK2 富含脯的酪激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
Hepsin 跨膜蛋白絲1抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human IgG F(ab')2/Alexa Fluor 350 Alexa Fluor 350標記的兔抗人IgG F(ab')2 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-CD18 (Ser756/Thr758/759) 磷酸化整合素β2抗體 規(guī)格: 0.1ml
APPD/LAPF 凋亡誘導蛋白D抗體 規(guī)格: 0.2ml
IMPDH2 5'磷酸脫2抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-HDAC3 (Ser424) 磷酸化組蛋白去乙酰化3抗體 規(guī)格: 0.1ml
NLRP9 富含亮重復(fù)結(jié)構(gòu)域蛋白9抗體 規(guī)格: 0.2ml
CTAG1B/Cancer/testis antigen 1 瘤/睪抗原1B 0.2ml
CDO1 半胱雙加氧1抗體 規(guī)格: 0.2ml
C1orf19/SEN15 1號染色體開放閱讀框19抗體 規(guī)格: 0.2ml
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