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ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒紫外分光光度

簡要描述:ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒紫外分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:細(xì)菌L型增菌液 英文名稱:Bacterial L-growing Broth 產(chǎn)品規(guī)格:65g 細(xì)菌L型分離瓊脂 英文名稱:Bacterial L-growing Agar 產(chǎn)品規(guī)格:110g 溶血瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:250g 龍膽紫血液瓊脂基礎(chǔ) 英文名稱:Crystal violet blood agar base

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-27
  • 訪  問  量:728

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。

產(chǎn)品名稱:ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒紫外分光光度

產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣

檢測方法:紫外分光光度法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6664

產(chǎn)品分類:脂肪酸代謝系列
商品介紹:

測定意義:

ACLEC4.1.3.8)是脂肪酸合成中的關(guān)鍵酶,其催化產(chǎn)生的乙酰可用于脂肪酸合成和碳鏈延長、黃酮類物質(zhì)合成、氨基酸合成等。

測定原理:

ACLATP和存在的情況下催化檸檬酸裂解為乙酰、草酰乙酸、腺苷二磷酸和磷酸鹽。蘋果酸脫氫酶進(jìn)一步催化草酰乙酸和NADH生成蘋果酸和NAD+,在340nm測定NADH減少速率,計(jì)算ACL活性。

需自備的儀器和用品:

紫外分光光度計(jì)、臺(tái)式離心機(jī)、水浴鍋、移液器、1mL石英比色皿、研缽、冰和蒸餾水

所需的儀器和用品:

可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見勻漿器)4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長到40min)。對(duì)照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

李斯特氏菌顯色培養(yǎng)基 Listera Chromogenic Medium 1000(ML)

10mL RNA洗脫液 RNA Elution Buffer 常溫

2 ug pDONR/Zeo pDONR/Zeo 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

NAC瓊脂培養(yǎng)基 NAC Agar Medium 250g

50mg 丙酮酸激 Pyruvate Kinase 4℃保存

50T 嗜水氣單胞菌PCR檢測試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

2 mg PD 98059(MAPKK抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Formalin-Zinc Solution  Formalin-Zinc Solution  常溫保存

5次 BCIP-NBT法辛雜交檢測試劑盒 BCIP-NBT DIG Detection Kit 10×封堵液和BCIP-NBT濃縮液需要-20℃保存,AP標(biāo)記的抗DIG抗體需要4℃保存

250mL HEPES Lysis Buffer with Triton  HEPES Lysis Buffer with Triton  常溫保存

60g/L氯化鈉蛋白胨肉湯 60g%/L NaCl Peptone Water 250g

ATP檸檬酸裂解酶(ACL)測試盒紫外分光光度phospho-CTNNA1 (Ser641)  磷酸化α-連環(huán)蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

Rabbit Anti-Goat IgM/PE-Cy5.5  PE-Cy5.5標(biāo)記的兔抗羊IgM 規(guī)格: 0.1ml

Listeria tropina  李斯特菌菌體蛋白抗體 規(guī)格: 1ml

phospho-STAT6(Tyr641)  磷酸化信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子6抗體 規(guī)格: 0.1ml

BEND2/CXorf56  BEND2蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

phospho-Eg5(Tyr92)  磷酸化驅(qū)動(dòng)蛋白樣蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml

NFAT1/NFATc2  核因子活化T細(xì)胞胞漿蛋白2抗體 規(guī)格: 0.1ml

PIBF  孕激素誘導(dǎo)阻斷因子抗體 規(guī)格: 0.2ml

APOL3  載脂蛋白L3抗體 規(guī)格: 0.2ml

CXCL13/BCA1  B-淋巴細(xì)胞趨化因子抗體 規(guī)格: 0.1ml

CEA  胚抗原抗體 規(guī)格: 0.1ml

Thymosin beta 4  胸素β4抗體 規(guī)格: 0.2ml 

 


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