儀器：
1、分光光度計/酶標儀/半自動生化分析儀（比色測定波長為550nm）
2、恒溫水浴箱或氣浴箱 （孵育溫度為37℃）
3、臺式離心機
4、漩渦混勻器
5、微量移液器
樣本收集與前處理：
血清（漿）可直接測定。
紅細胞：需按照試劑盒中說明書上紅細胞的測定方法進行提取后測定。
動物組織樣本：可用生理鹽水按重量體積比制備成組織勻漿液，離心取上清測定。
培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織：常用PBS作為勻漿介質(zhì)破碎后離心取上清測定。
具體的樣本前處理：參考我們隨貨發(fā)送的《實驗方法學》以及試劑盒中詳細說明書。

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測定步驟：
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準確
3.管底加樣，不能加在管壁上
4.加樣時不能產(chǎn)生氣泡
2.加溫
1.加標本后和加結合物后，應立即放入按規(guī)定的反應溫 度的水浴箱。
2.各ELISA板不應疊在一起。
3.為避免蒸發(fā)，板上應加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕 紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后，反應的時間和溫度通常不做嚴格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實驗臺上，以便 不時觀察，待對照管顯色適當時，即可終止酶反應。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應步驟，但卻 是決定實驗成敗的關鍵。
2.目的是洗去反應液中沒有與固相抗原或 抗體結合的物質(zhì)以及在反應過程中非特 異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對照顏色極淺，在定性測定中一般 可采用目視比色。
2.如用酶標儀測定結果，準確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標儀的質(zhì) 量和軟件的算法。
優(yōu)點如下：
1、快速簡便：全程約50分鐘，可測100例左右樣本。
2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測紅細胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測白細胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗： X =103.3%。
7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復性強。
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。
實驗通用規(guī)則：

SHH Protein Human 重組人 SHH / Sonic hedgehog 蛋白 (aa 1-197, His 標簽)炔雌醇3-醋酸鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口Ethynyl Estradiol 3-Acetate

人成纖維細胞;HFF Hepa 1-6, 小鼠肝癌細胞 Mouseβ-雌二醇 3-(β-D-葡萄糖苷酸)鈉鹽質(zhì)量規(guī)格：美國進口β-Estradiol 3-(β-D-glucuronide)  salt

雜交瘤(B類);IB3C10H12A12G2H8F32-羥基炔雌醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口2-Hydroxy Ethynyl Estradiol

人視網(wǎng)膜內(nèi)皮細胞 (HREC)( 5×105 )4-羥基炔雌醇質(zhì)量規(guī)格：美國進口4-Hydroxy Ethynyl Estradiol

CM-M059小鼠膀胱平滑肌細胞*培養(yǎng)基100mL炔雌醇 3-β-D-葡萄糖苷酸質(zhì)量規(guī)格：美國進口Ethynyl Estradiol 3-β-D-Glucuronide
REG3A Others Human 人 REG3A / HIP 人細胞裂解液 (陽性對照) 6,7-亞甲二氧基-4--3-馬來(>98.0%(HPLC)(N))6,7-Methylenedioxy-4-methyl-3-maleimidocoumarin質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(HPLC)(N)

羅猴胎腎細胞;MA1044--6,7-亞二氧代(>99.0 %(GC))4-Methyl-6,7-methylenedioxycoumarin質(zhì)量規(guī)格： >99.0 %(GC)

PROCR Others Cynomolgus 食蟹猴 Epcr / PROCR 人細胞裂解液 (陽性對照) 7-甲氧基-3-羧酸(>98.0%(GC)(T))7-Methoxycoumarin-3-carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格：>98.0%(GC)(T)

CL-0229T84(人結腸腺癌肺轉(zhuǎn)移細胞)5×106cells/瓶×2溶劑綠 7(>85.0%(E))Pyranin質(zhì)量規(guī)格：>85.0%(E)

SH-77細胞，小細胞肺癌 人T細胞白血病細胞,T-CEM細胞 人T瘤轉(zhuǎn)基因細胞;Jurkat D,E磺酰熒光素(>75.0%(HPLC)(T))Sulfonfluorescein質(zhì)量規(guī)格：>75.0%(HPLC)(T)
人晶體上皮細胞永生系;SRA01/04(HLE)1品紅，英文名或英文縮寫：Carbol fuchsin，級別：FMP，84%，規(guī)格：1克

SMPD1 Others Mouse 小鼠 SMPD1 / ASM 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) R(-)N(3，5-二肖基本酰)基卞安 (R)-(-)-N-(3,5-BqNZOYL)-cLPHc-PHqNYLqTHYLcMINq 6963-3-

CM-H030人外周血白細胞*培養(yǎng)基100mL左拉西坦 LqvqtirccqtcM 10767-8-

MG-63, 人骨肉瘤細胞 肝癌細胞,CBRH-7919細胞 TT(人骨髓樣甲狀腺癌細胞)銀杏葉提取物，英文名或英文縮寫：Ginkgo biloba，級別：CP，24.7%，規(guī)格：25克

正常小鼠Sertoli細胞;TM4123855-51-6N-Boc-4-派啶N-Boc-4-pipeni7inemetxanol
GSK3β Phospho-Ser9 AntibodyFC33(人胚胎腎細胞(Asp-2基因修飾)) 5×106cells/瓶×2 小鼠巨噬細胞MMa頭孢他啶-d5Ceftazidime-d5質(zhì)量規(guī)格：美國進口

外周血白細胞Many types of cells包裝：5 × 105方(1ml)Δ2-頭孢他啶Δ2-Ceftazidime質(zhì)量規(guī)格：美國進口

YES1 Others Human 人 c-Yes / YES1 桿狀病毒-昆蟲細胞裂解液 (陽性對照) 頭孢他啶五水化合物Ceftazidime Pentahydrate質(zhì)量規(guī)格：美國進口

正常大鼠腎細胞;NRK頭孢唑啉Cefazolin質(zhì)量規(guī)格：美國進口

KG-1細胞，白血病細胞 人肝癌細胞,Hep3B2.1-7細胞 CL-0032BEL-7404(人肝癌細胞)5×106cells/瓶×217β-羧酸氟替卡Fluticasone 17β-Carboxylic Acid質(zhì)量規(guī)格：美國進口

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