當(dāng)前位置:首頁(yè) > 產(chǎn)品中心 > 生化檢測(cè)試劑盒 > 氧化與抗氧化系列 > 50μl類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法
簡(jiǎn)要描述:類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:志賀氏菌增菌肉湯-新生 英文名稱:Shigella Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 尿素瓊脂(PH7.2) 英文名稱:Urease Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 新生(125ug/支) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:125ug/支*5 半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂 英文名稱:Semisolid Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測(cè)定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。
產(chǎn)品名稱:類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法
產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣
檢測(cè)方法:微量法
產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6470
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測(cè)定意義: 花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物?;ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。 類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT)是花色苷合成過(guò)程的最后一個(gè)酶,可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷,在一定范圍內(nèi),UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。 測(cè)定原理: UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADH為NAD+,NAD+生成速度與UDP含量成正比,通過(guò)340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。 需自備的儀器和用品: 酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔酶標(biāo)板、研缽、冰和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。
2、對(duì)照管只需要做一管。
3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?
對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
10次 百萬(wàn)堿基級(jí)血液DNAout
2 ug pEF1/myc-His C pEF1/myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
改良番茄汁培養(yǎng)基 Tomato Juice Agar,Modified 250g
5g β- 硫代酸 TBA(2-Thiobarbituric Acid) 密封干燥保存
50T 粘附性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5mL CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效
500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5 Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5 常溫保存
10次 DNA Shuffing試劑盒 DNA Shuffling Kit -20℃保存
2 ug pLV-EBFP2-nuc pLV-EBFP2-nuc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10%NaCl卵黃乳液 5ml*10支
1瓶 NCI-H209細(xì)胞株 NCI-H209 低溫運(yùn)輸和保存
類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法Insulin 抗抗體 規(guī)格: 0.1ml
ITGB4 整合素β4抗體 規(guī)格: 0.1ml
Caspase 2 半胱胺酸蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml
HIDE1/C19orfC38 19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體 規(guī)格: 0.2ml
NFATc1/NFAT2 活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
SRRM3 絲/相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml
MTHFR 亞甲基還原MTHFR抗體 規(guī)格: 0.1ml
Donkey Anti-rabbit IgG/AP 堿性磷酸(AP)標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml
KSR1 Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Phospho-cdc25C (Ser216) 磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml
Cecropin 抗菌肽/天蠶素抗體 規(guī)格: 0.2ml
MEK6 絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 規(guī)格: 0.1ml
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