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當(dāng)前位置:首頁(yè)   >  產(chǎn)品中心  >  生化檢測(cè)試劑盒  >  氧化與抗氧化系列  >  50μl類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法

類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:志賀氏菌增菌肉湯-新生 英文名稱:Shigella Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g 尿素瓊脂(PH7.2) 英文名稱:Urease Agar Base 產(chǎn)品規(guī)格:250g 新生(125ug/支) 英文名稱: 產(chǎn)品規(guī)格:125ug/支*5 半固體營(yíng)養(yǎng)瓊脂 英文名稱:Semisolid Nutrient Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g

  • 產(chǎn)品型號(hào):50μl
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-28
  • 訪  問(wèn)  量:555

詳細(xì)介紹

實(shí)驗(yàn)方法學(xué):

一、肝素的配制:

市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤(rùn)管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會(huì)凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。

肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤(rùn)管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動(dòng),每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動(dòng)一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。

二、血液樣本的收集:

全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時(shí),不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。

1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時(shí),直接低速離心分離出血清待用或保存。

2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時(shí)左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。

選擇抗凝的注意點(diǎn):

①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時(shí)所取的全血的量也要盡量一致;

②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;

③、抗凝全血收集的血漿相對(duì)較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);

④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時(shí)可能會(huì)出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后

用于測(cè)定。

特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。

產(chǎn)品名稱:類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法

產(chǎn)品規(guī)格:100管/96樣

檢測(cè)方法:微量法

產(chǎn)品貨號(hào):BK-01S6470

產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:

測(cè)定意義:

花色苷是一類易溶于極性溶劑的天然色素,屬黃酮類化合物?;ㄉ諒V泛存在于植物的根、莖、葉、花和果實(shí)中,使其呈現(xiàn)由紅到紫等不同顏色,是植物主要的呈色物質(zhì)。

類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UDP-glycose flavonoid glycosyltransferase, UFGT)是花色苷合成過(guò)程的最后一個(gè)酶,可以把不穩(wěn)定的花色素催化成花色苷,在一定范圍內(nèi),UFGT活性與花色素苷的合成呈現(xiàn)正相關(guān)。

測(cè)定原理:

UFGT催化UDPG與槲皮素生成UDP;UDP在丙酮酸激酶與乳酸脫氫酶作用下,氧化NADHNAD+,NAD+生成速度與UDP含量成正比,通過(guò)340nm吸光度下降速度反映UFGT活性。

需自備的儀器和用品:

酶標(biāo)儀、水浴鍋、可調(diào)式移液器、96孔酶標(biāo)板、研缽、冰和蒸餾水。

所需的儀器和用品:

可見(jiàn)分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水

四、超氧化物歧化酶(SOD)的測(cè)定:

建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個(gè)樣本做預(yù)測(cè)定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)

樣本和試劑浪費(fèi)!

1、樣本制備

組織樣本:

取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行

勻漿(或使用各類常見(jiàn)勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測(cè)液。

【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)15~10 的比例進(jìn)行提取

 

細(xì)菌/細(xì)胞樣本:

先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬(wàn)細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL

提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次);

12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測(cè)。

【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10

4):提取液(mL)為 500~10001 的比例進(jìn)行提取。 液體樣本:直接檢測(cè);若渾濁,離心后取上清檢測(cè)。

QQ截圖20220307153537.png 

注意事項(xiàng):

1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時(shí)在冰上放置。

2、對(duì)照管只需要做一管。

3、若對(duì)照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。

4、SOD為什么有的樣本測(cè)定管大于對(duì)照管,對(duì)照管數(shù)值在什么范圍?

對(duì)照管的范圍是0.8-2。對(duì)照管吸光值過(guò)低可能是(1)試劑二或試劑四沒(méi)有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒(méi)有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時(shí)間不夠,可以延長(zhǎng)反應(yīng)時(shí)間(反應(yīng)時(shí)間30min可以延長(zhǎng)到40min)。對(duì)照管吸光值過(guò)高可能是試劑二未按操作說(shuō)明書(shū)稀釋相應(yīng)倍數(shù)。

若出現(xiàn)測(cè)定管大于對(duì)照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測(cè),通常可以使測(cè)定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。

10次 百萬(wàn)堿基級(jí)血液DNAout  

2 ug pEF1/myc-His C pEF1/myc-His C 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

改良番茄汁培養(yǎng)基 Tomato Juice Agar,Modified 250g

5g β- 硫代酸 TBA(2-Thiobarbituric Acid) 密封干燥保存

50T 粘附性大腸桿菌PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

5mL CCK-8細(xì)胞增殖及毒性檢測(cè)試劑盒 Cell Counting Kit-8 4℃避光保存一年有效,-20℃避光保存兩年有效

500mL Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5  Mcilvaine Buffer (Citrate Phosphate Buffer),0.2M,pH3.5  常溫保存

10次 DNA Shuffing試劑盒 DNA Shuffling Kit -20℃保存

2 ug pLV-EBFP2-nuc pLV-EBFP2-nuc 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

10%NaCl卵黃乳液  5ml*10支

1瓶 NCI-H209細(xì)胞株 NCI-H209 低溫運(yùn)輸和保存

類黃酮糖基轉(zhuǎn)移酶(UFGT)測(cè)試盒微量法Insulin  抗抗體 規(guī)格: 0.1ml

ITGB4  整合素β4抗體 規(guī)格: 0.1ml

Caspase 2  半胱胺酸蛋白-2抗體 規(guī)格: 0.1ml

HIDE1/C19orfC38  19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框38抗體 規(guī)格: 0.2ml

NFATc1/NFAT2  活化T細(xì)胞核因子1蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml

SRRM3  絲/相關(guān)核基質(zhì)蛋白3抗體 規(guī)格: 0.2ml

MTHFR  亞甲基還原MTHFR抗體 規(guī)格: 0.1ml

Donkey Anti-rabbit IgG/AP  堿性磷酸(AP)標(biāo)記的驢抗兔IgG 規(guī)格: 0.1ml

KSR1  Ras信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)KSR1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

Phospho-cdc25C (Ser216)  磷酸化細(xì)胞分裂周期蛋白25C抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cecropin  抗菌肽/天蠶素抗體 規(guī)格: 0.2ml

MEK6  絲裂原活化蛋白激MKK6抗體 規(guī)格: 0.1ml 

 


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