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簡要描述:羥自由基清除能力測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:M-腸道菌瓊脂 英文名稱:M-Enterococcus Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g 糞腸球菌瓊脂 英文名稱:Enterococcus faecalis Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g THB培養(yǎng)基 英文名稱:THB Medium 產(chǎn)品規(guī)格:250g PS瓊脂 英文名稱:PS Agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g
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實(shí)驗(yàn)方法學(xué):
一、肝素的配制:
市售肝素凍干粉140單位/mg,1克瓶裝,每瓶140,000單位,稱取0.1克肝素凍干粉,加生理鹽水5ml,配成2800單位/ml。取50~100μl濕潤管壁,可抗凝人血3~5ml,血液不會凝固。老鼠血易凝固,所以最好更濃一些??梢匀?.1克肝素凍干粉,加3ml生理鹽水溶解后,取50~100μl,可抗凝鼠血2~4ml。
肝素抗凝管的制備:取0.1克肝素凍干粉,加2.5ml生理鹽水。取100μl~150μl滴入塑料或玻璃管中,濕潤管壁,低于80℃小烤箱中(可以用烤面包的小烤箱),橫向轉(zhuǎn)動,每隔5~10分鐘轉(zhuǎn)動一次,直至干燥后放入4℃保存,可使2~5ml血液不凝固。
二、血液樣本的收集:
全血根據(jù)收集的條件,分成不抗凝和抗凝兩種。同時,不抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血清;抗凝分離出的上層黃色的液體我們稱之為血漿。
1、不抗凝收集血清:將收集好的全血,靜置1~2小時,直接低速離心分離出血清待用或保存。
2、抗凝收集血漿: 收集抗凝全血,輕輕顛倒充分抗凝后,可直接低速離心分離血漿(也可靜置半小時左右再低速離心分離血漿)待用或保存。根據(jù)不同抗凝劑的性能特征,選擇合適的抗凝劑。實(shí)驗(yàn)室常用的抗凝劑有肝素的各種鹽、EDTA及。
選擇抗凝的注意點(diǎn):
①、每一份樣本所加的抗凝劑的量要一致,同時所取的全血的量也要盡量一致;
②、收集抗凝全血后一定要輕輕顛倒,充分抗凝,防止部分血液未接觸到抗凝劑而導(dǎo)致凝固;
③、抗凝全血收集的血漿相對較多(1ml抗凝全血能分離出0.4~0.5ml血漿);
④、抗凝收集的血漿冷凍保存后,解凍時可能會出現(xiàn)絮狀渾濁,如有則需要離心去掉渾濁后
用于測定。
特別提醒:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測。
產(chǎn)品名稱:羥自由基清除能力測試盒可見分光光度法
產(chǎn)品規(guī)格:50管/48樣
檢測方法:可見分光光度法
產(chǎn)品貨號:BK-01S6442
產(chǎn)品分類:氧化與抗氧化系列
商品介紹:
測定意義: 羥自由基作用于體內(nèi)蛋白質(zhì)、核酸、脂類等生物分子,造成細(xì)胞結(jié)構(gòu)和功能受損,進(jìn)而導(dǎo)致體內(nèi)代謝紊亂引起疾病。羥自由基清除能力是樣品抗氧化能力的重要指標(biāo)之一,在抗氧化類保健品和藥品研究中得到廣泛應(yīng)用。 測定原理: H2O2/ Fe2+ 通過Fenton反應(yīng)產(chǎn)生羥自由基,水楊酸能有效捕捉產(chǎn)生的羥自由基并與其反應(yīng)生成有色物質(zhì)2,3-二羥基苯甲酸,在510nm處有最大吸收峰,加入具有清除能力的物質(zhì)后,有色物質(zhì)便會減少,從而可以根據(jù)吸光值的數(shù)值判斷樣品清除羥自由基的能力。 自備實(shí)驗(yàn)用品: 恒溫水浴鍋、酶標(biāo)儀、96孔板和蒸餾水。 |
所需的儀器和用品:
可見分光光度計(jì)、1mL 玻璃比色皿(光徑 1cm)、低溫離心機(jī)、移液器、研缽、冰和蒸餾水
四、超氧化物歧化酶(SOD)的測定:
建議正式實(shí)驗(yàn)前選取 2 個樣本做預(yù)測定,了解本批樣品情況,熟悉實(shí)驗(yàn)流程,避免實(shí)驗(yàn)
樣本和試劑浪費(fèi)!
1、樣本制備
① 組織樣本: 取約 0.1g 組織(水分充足的樣本可取 0.25g),加入 1mL 提取液,在 4oC 或冰浴進(jìn)行 勻漿(或使用各類常見勻漿器)。4oC×12000rpm 離心 10min,取上清作為待測液。 【注】:若增加樣本量,可按照組織質(zhì)量(g):提取液體積(mL)為 1:5~10 的比例進(jìn)行提取
| ② 細(xì)菌/細(xì)胞樣本: 先收集細(xì)菌或細(xì)胞到離心管內(nèi),離心后棄上清;取約 500 萬細(xì)菌或細(xì)胞加入 1mL 提取液,超聲波破碎細(xì)菌或細(xì)胞(冰浴,功率 200W,超聲 3s,間隔 10s,重復(fù) 30 次); 12000rpm 4℃離心 10min,取上清,置冰上待測。 【注】:若增加樣本量,可按照細(xì)菌/細(xì)胞數(shù)量(10 4):提取液(mL)為 500~1000:1 的比例進(jìn)行提取。 ③ 液體樣本:直接檢測;若渾濁,離心后取上清檢測。 |
注意事項(xiàng):
1、試劑二為酶,不可冷凍,使用時在冰上放置。
2、對照管只需要做一管。
3、若對照管吸光值大于2,建議將試劑二用蒸餾水稀釋7倍后使用(10μl試劑二原液+60μl蒸餾水)。
4、SOD為什么有的樣本測定管大于對照管,對照管數(shù)值在什么范圍?
對照管的范圍是0.8-2。對照管吸光值過低可能是(1)試劑二或試劑四沒有現(xiàn)配現(xiàn)用;(2)沒有按順序加試劑;(3)反應(yīng)時間不夠,可以延長反應(yīng)時間(反應(yīng)時間30min可以延長到40min)。對照管吸光值過高可能是試劑二未按操作說明書稀釋相應(yīng)倍數(shù)。
若出現(xiàn)測定管大于對照管,可能是樣本中雜質(zhì)的影響太大,為了降低雜質(zhì)的影響一般將樣本提取上清液用蒸餾水或提取液稀釋10倍后再測,通常可以使測定正常。計(jì)算公式中乘以相應(yīng)稀釋倍數(shù)。
100g 肌醇 Inositol 室溫干燥保存
50T 流感病毒甲型H1N1 PCR檢測試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5mL 心肌細(xì)胞生長因子 Growth Factor For Cell Culture -20℃保存
50mL Ammonium Chloride(氯化銨溶液), 0.5M Ammonium Chloride, 0.5M 常溫保存
10 mg DiI (細(xì)胞膜紅色熒光探針) Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存
1瓶 PC-12(高分化)細(xì)胞株 PC-12(高分化) 低溫運(yùn)輸和保存
肉浸液肉湯培養(yǎng)基 Meat Infusion Broth 250g
10g 氯化銫 Cesium Chloride(CsCl) 室溫干燥保存
50mL Zinc Sulfate Solution(硫酸鋅溶液),100mM Zinc Sulfate Solution,100mM 常溫保存
100g 十二烷基磺酸鈉 SDS 常溫保存
2 ug pBBR1-MCS2 pBBR1-MCS2 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
羥自由基清除能力測試盒可見分光光度法C2orf55 2號染色體開放閱讀框55抗體 規(guī)格: 0.2ml
BXDC1 BXDC1蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
PACAP R1 苷酸環(huán)化激活肽受體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
RICTOR 雷帕霉素靶蛋白復(fù)合體2抗體 規(guī)格: 0.2ml
H2N2 Hemagglutinin 甲型毒凝素抗體(H2N2) 規(guī)格: 0.2ml
Mouse Anti-Goat IgG/HRP 辣根過氧化物標(biāo)記的小鼠抗羊IgG 規(guī)格: 0.1ml
phospho-p107/RBL1(Ser975) 磷酸化視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤樣蛋白p107抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-MEK2(Tyr78) 磷酸化絲裂原活化蛋白激激2抗體 規(guī)格: 0.1ml
phospho-GABRG2(Ser327) 磷酸化γ氨基丁酸γ2受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
ADH/AVP 抗利尿激素/管升壓素抗體(和肽素) 0.1ml
Phospho-p53BP1 (Ser1778) 磷酸化p53結(jié)合蛋白1抗體 規(guī)格: 0.1ml
CCK8 膽囊收素8抗體 規(guī)格: 0.1ml
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