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簡(jiǎn)要描述:葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒微量法公司正在出售的產(chǎn)品:pH7.3PBS緩沖液 英文名稱(chēng):PBS 產(chǎn)品規(guī)格:250g MEE肉湯 英文名稱(chēng):MEE Broth 產(chǎn)品規(guī)格:250g TTC乳糖瓊脂 英文名稱(chēng):Lactose TTC agar 產(chǎn)品規(guī)格:250g MI培養(yǎng)基 英文名稱(chēng):MI Medium 產(chǎn)品規(guī)格:1000ml
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實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線(xiàn)計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽(yáng)性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽(yáng)性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽(yáng)性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽(yáng)性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類(lèi)及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱(chēng) | 規(guī)格 | 檢測(cè)方法 | 貨號(hào) |
葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒微量法 | 100管/48樣 | 微量法 | BK-01S6417 |
商品介紹:
測(cè)定意義: GOD(EC 1.1.3.4)廣泛存在于動(dòng)物、和植物中,催化葡萄糖氧化生成葡萄糖酸,并產(chǎn)生H2O2,是生物體中產(chǎn)生活性氧的代謝途徑之一。 測(cè)定原理: GOD催化產(chǎn)生H2O2,過(guò)氧化物酶在有氧存在時(shí)催化H2O2分解產(chǎn)生的氧又將鄰聯(lián)茴香胺氧化生成有色物質(zhì),顏色深淺與葡萄糖氧化酶活性成線(xiàn)性關(guān)系。 試驗(yàn)中所需的儀器和設(shè)備: 可見(jiàn)分光光度計(jì)/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺(tái)式離心機(jī)、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰、蒸餾水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準(zhǔn)備:
a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類(lèi)常見(jiàn)電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。
2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋?zhuān)礊榉磻?yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說(shuō)明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽(yáng)性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。
50T 大豆NOS/SS PCR檢測(cè)試劑盒 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
10次 預(yù)染蛋白質(zhì)電泳分子量標(biāo)準(zhǔn)(43-200 KD) Prestained Protein Marker -20℃保存
2 ug pYFP-Tublin pYFP-Tublin 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
5次 中提柱式BAC DNAout Midi Column BAC DNAOUT 常溫保存(RNase A溶液4℃保存)
2 ug pET-30a(+) pET-30a(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存
250mL 動(dòng)物DNAout Animal DNAOUT 常溫
1瓶 801-D細(xì)胞株 801-D 低溫運(yùn)輸和保存
硫乙醇酸鹽流體培養(yǎng)基顆粒 Thioglycollate Medium 300ml/袋*10
100次 總SOD活性檢測(cè)試劑盒(NBT法) Oxidative Stress Detection Kit 常溫保存
250ML MES Lysis Buffer with NP-40 MES Lysis Buffer with NP-40 常溫保存
100次 轉(zhuǎn)ESPES基因植物PCR Mix (35S-EPSES 基因) Plant DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存
葡萄糖氧化酶(GOD)測(cè)試盒微量法TCEB3/Elongin A 轉(zhuǎn)錄延伸因子3抗體 規(guī)格: 0.1m
LDL receptor 脂蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
RAB7 RAS基因相關(guān)蛋白R(shí)AB7抗體 規(guī)格: 0.1ml
ZNF431 鋅指蛋白431抗體 規(guī)格: 0.2mlRabbit anti-MG IgG/APC APC標(biāo)記的兔抗爪沙鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
CRCT1 富含半胱C端蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-ATF2(Ser94) 磷酸化活化復(fù)制因子2抗體 規(guī)格: 0.1ml
ERM/Etv5 轉(zhuǎn)錄因子Ets差異基因5抗體 規(guī)格: 0.2mlhHBrk1 微絲相關(guān)蛋白hHBrk1抗體 規(guī)格: 0.1ml
G6PDH/H6PD 己糖6磷酸脫抗體 規(guī)格: 0.2mlSMN1 運(yùn)動(dòng)神經(jīng)元生存蛋白1 規(guī)格: 0.1ml
ETV7 轉(zhuǎn)錄因子ETV7抗體 規(guī)格: 0.2mlpresenilin 1/PS-1 (NT) 早老素蛋白-1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Phospho-BLNK(Tyr96) 磷酸化T淋巴細(xì)胞連接蛋白抗體 規(guī)格: 0.1mlLaminin B2 gamma 1 層粘連蛋白B2γ1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Rabbit Anti-Biotin/Alexa Fluor 555 Alexa Fluor 555標(biāo)記的兔抗抗體IgG 規(guī)格: 0.1mlNanog 胚胎干細(xì)胞關(guān)鍵蛋白抗體 規(guī)格: 0.1ml
Persephin PSP抗體 規(guī)格: 0.1mlMMP-7 基質(zhì)金屬蛋白-7抗體 規(guī)格: 0.1ml
EPCR/CD201 內(nèi)皮細(xì)胞活化蛋白受體抗體 規(guī)格: 0.2mlphospho-EGFR (Tyr1092) 磷酸化表皮生因子受體抗體 規(guī)格: 0.1ml
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