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簡要描述:脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法輔酶Ⅱ系列公司正在出售的產(chǎn)品:單料乳糖膽鹽發(fā)酵培養(yǎng)基管(含小倒管) 英文名稱:Lactose Bile Ferment Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包 乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(含小倒管) 英文名稱:Lactose Peptone Broth 產(chǎn)品規(guī)格:10ml*20支/包 雙料乳糖蛋白胨培養(yǎng)液(含小倒管) 英文名稱:Double Lactose Pepton
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實驗結(jié)果判斷我有妙招:
1、定量測定結(jié)果根據(jù)標準曲線計算樣品中待測物的含量。
2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。
3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。
4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。
與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:
① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風、遠離火源處保存。
② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。
③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。
④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。
⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風處保存。
本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!
產(chǎn)品名稱 | 規(guī)格 | 檢測方法 | 貨號 |
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法 | 100管/96樣 | 微量法 | BK-01S6365 |
商品介紹:
測定意義: 細胞內(nèi)脂質(zhì)的積累是脂質(zhì)合成與分解失衡的結(jié)果。脂肪酸合成增多,而氧化分解降低,會導致細胞內(nèi)脂質(zhì)積累。FAS是脂肪酸合成關(guān)鍵酶,催化乙酰和丙二酰而生成長鏈脂肪酸。FAS普遍表達于各種組織細胞中,在哺乳動物肝、腎、腦、肺和乳腺以及脂肪組織中表達豐富。 測定原理 以NADPH為還原力,FAS催化乙酰CoA和丙二酰CoA生成長鏈脂肪酸;通過測定NADPH的減少量,即可推算出FAS活性。 實驗中所需儀器和用品 研缽、冰、臺式離心機、紫外分光光度計、1mL石英比色皿、可調(diào)式移液槍和雙蒸水。 |
試劑組成和配制:
提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。
試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。
操作步驟:
1. 樣品的準備:
a. 細胞樣品的準備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。
b. 組織樣品的準備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。
d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。
e. 根據(jù)蛋白濃度和預計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準備好的樣品如果當天測定,可以冰浴保存;如果當天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當天完成測定。
2. 試劑盒的準備工作:
a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標準品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當混勻后再使用。
b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。
c. (可選做) SOD 標準品準備:需自備SOD標準品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標準品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標準品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標準品,但可以使用SOD標準品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。
幽門螺旋桿菌培養(yǎng)基(液體) Helicobacter Pylori Medium 250g
1瓶 RBL-1細胞株 RBL-1 低溫運輸和保存
膽汁肉湯 Bile Broth 100g
1g Cyclophosphamide Monolydrate 4℃保存
50T 蠶微粒子病PCR檢測試劑盒 低溫運輸,-20℃保存
30次 一站式長效期SDS-PAGE電泳套裝 (適合30 kD以上蛋白) One-Stop Stable SDS-PAGE Pack 4℃保存(上樣緩沖液需要-20℃保存)
2 ug pYADE4 pYADE4 低溫運輸,-20℃保存
30次 線狀DNA清除劑 Linear DNA Erasol 常溫保存(溶液A需要低溫運輸,-20℃保存)
2 ug pET-Trx pET-Trx 低溫運輸,-20℃保存
改良緩沖蛋白胨水(MBP) Modified Buffered Peptone Water 250g
2 ug pDG1363 pDG1363 低溫運輸,-20℃保存
脂肪酸合成酶(FAS)測試盒微量法MFAP3L 微絲相關(guān)蛋白3樣抗體 規(guī)格: 0.1ml
TASK 3/KCNK9 酸敏性鉀離子通道蛋白抗體 0.2ml
phospho-Crkl(Tyr244) 磷酸化接蛋白CrkL抗體 規(guī)格: 0.1ml
VGLUT1/BNP1 腦特異性鈉依賴無機磷轉(zhuǎn)運蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
Integrin β1/CD29 整合素β1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Sertad1 調(diào)控周期蛋白依賴蛋白激SEI1抗體 規(guī)格: 0.1ml
FABPB 腦型脂肪酸結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml
STK38 絲/蘇蛋白激38抗體 規(guī)格: 0.2ml
Rabbit Anti-human sIgA/PE-Cy3 PE-Cy3標記的兔抗人分泌型IgA 規(guī)格: 0.1ml
NPTX1 神經(jīng)細胞正五聚體1抗體 規(guī)格: 0.1ml
Goat Anti-Guinea pig IgG/Cy5 Cy5標記的羊抗豚鼠IgG 規(guī)格: 0.1ml
C19orf54 19號染色體開放閱讀框54抗體 規(guī)格: 0.2ml
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