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甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒微量法

簡(jiǎn)要描述:甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒微量法輔酶Ⅰ系列公司正在出售的產(chǎn)品:巧克力瓊脂平板(9cm) 英文名稱:Chocolate Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 伊紅美藍(lán)瓊脂平板(9cm) 英文名稱:Eosin-Methylene Blue Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 SS瓊脂平板(9cm) 英文名稱:Salmonella Shigella Agar 產(chǎn)品規(guī)格:10個(gè)/包 HE瓊脂平板(9cm) 英文名稱

  • 產(chǎn)品型號(hào):
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時(shí)間:2023-12-29
  • 訪  問  量:606

詳細(xì)介紹

商品介紹:

測(cè)定意義:

甲醛是一種能與蛋白質(zhì)、核酸和脂類產(chǎn)生非特異性反應(yīng)的活潑化合物,對(duì)所有生物都具有很高毒性。甲醛脫氫酶作為含鋅中等鏈醇脫氫酶(ADH)的家庭成員之一,廣泛存在于原核和真核生物中,該酶能利用NAD+作為輔酶,將有毒的甲醛氧化,是甲醛氧化途徑中的關(guān)鍵酶。

測(cè)定原理

甲醛脫氫酶催化甲醛和NAD+產(chǎn)生NADH,在340nm處的吸光值會(huì)增加,測(cè)定340nm處的吸光值變化,可計(jì)算得到甲醛脫氫酶的活性。

自備實(shí)驗(yàn)用品及儀器

天平、離心機(jī)、酶標(biāo)儀、96孔板、蒸餾水。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實(shí)驗(yàn)室提供免費(fèi)代測(cè),7個(gè)工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測(cè)方法

貨號(hào)

甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒微量法

100管/96樣

微量法

BK-01S6345

11.png 

實(shí)驗(yàn)結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測(cè)定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算樣品中待測(cè)物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對(duì)照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測(cè)定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競(jìng)爭(zhēng)法則淺于)陰性對(duì)照,與陰性對(duì)照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點(diǎn)的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠(yuǎn)離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠(yuǎn)離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長(zhǎng)期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細(xì)胞樣品的準(zhǔn)備:收集細(xì)胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細(xì)胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動(dòng)物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細(xì)胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動(dòng)勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測(cè)樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒(P1511)測(cè)定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細(xì)胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個(gè)活力單位左右(不同細(xì)胞和組織的差異會(huì)比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測(cè)。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計(jì)的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測(cè)緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測(cè)定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測(cè)定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測(cè)定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測(cè)樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動(dòng)工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動(dòng)液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動(dòng)液(40X) 加入39μl SOD 檢測(cè)緩沖液的比例進(jìn)行稀釋,即為反應(yīng)啟動(dòng)工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測(cè)中可以各取20微升,參考樣品進(jìn)行檢測(cè)。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對(duì)于SOD的檢測(cè)并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對(duì)照或作為對(duì)SOD活性定量的參考。

3%氯化鈉堿性蛋白胨水 3%Sodium Chloride Peptone Water 9ml*20支/包

50mg D- 氨基酸氧化 D-Amino Acid Oxidase 4℃保存

250mL RNase-Free SSPE(無RNase的SSPE),20X,pH7.4   RNase-Free SSPE,20X,pH7.4   常溫保存

1 管 JM1腸桿菌 JM110 E.coli Strain -80℃保存

2 ug pRNA-H1.1/Adeno pRNA-H1.1/Adeno 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100mL 動(dòng)物RNAout (TRIzol)  Animal RNAOUT(TRIzol) 4℃保存

2 ug pcDNA3.1/Zeo(+) pcDNA3.1/Zeo(+) 低溫運(yùn)輸,-20℃保存

100次 動(dòng)物種屬鑒定PCR Mix 2(16S rDNA) Animal DNA Barcoding PCR Mix -20℃保存

5g 甲基橙 Methyl Orange 室溫干燥保存

50T 牛海綿狀腦病毒PCR檢測(cè)試劑盒  低溫運(yùn)輸,-20℃保存

12x50nm Cyanine 3-NHS Ester Fluorescent Probe and Tracer -20℃保存

甲醛脫氫酶(FDH)測(cè)試盒微量法EBNA1/EBV Nuclear Antigen  EB毒核抗原1抗體 規(guī)格: 0.2ml

TPD54/TPD52L2  瘤蛋白D54蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

PDGF AB+BB  小板源性生因子AB+BB抗體 規(guī)格: 0.2ml

TRIM17/RNF16  環(huán)指蛋白16抗體 規(guī)格: 0.2mlGlutaminase  谷抗體 0.2ml

PTEN/MMAC1(NT)  一種瘤抑制基因抗體(N端) 規(guī)格: 0.1mlTubulin-beta  微管蛋白抗體(免疫組化用抗體)Tubulinβ 規(guī)格: 0.1ml

M2-PK (pyruvate Kinase M2)  丙酮酸激-M2 規(guī)格: 0.1mlCDX2/3  尾側(cè)型同源轉(zhuǎn)錄因子2/3抗體 規(guī)格: 0.2ml

KLHL22  Kelch樣蛋白22抗體 規(guī)格: 0.2mlKLK2  激肽釋放2抗體 規(guī)格: 0.1ml

phospho-TCF3/E2A/E47(Ser39)  磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 0.1mlCXCL16  CXC趨化因子16抗體 規(guī)格: 0.1ml

Cecropin monoclonal  殺菌肽/天蠶抗菌肽單克隆抗體 規(guī)格: 1mlABH8/ALKBH8  AlkB同源蛋白8抗體 規(guī)格: 0.2ml

LIPK  脂肪家庭成員K抗體 規(guī)格: 0.2mlPerilipin A  脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體 規(guī)格: 0.1ml

TLR11  Toll樣受體11抗體 規(guī)格: 0.2mlPhospho-GRB10 (Tyr67)  磷酸化生因子受體結(jié)合蛋白10抗體 規(guī)格: 0.1ml

Sigma1R  衰老相關(guān)基因8蛋白抗體 規(guī)格: 0.2mlDonkey Anti-human IgG/Gold  膠體金標(biāo)記的驢抗人IgG 規(guī)格: 0.5ml

 


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