當(dāng)前位置:首頁 > 產(chǎn)品中心 > 基因檢測PCR試劑盒 > 熒光定量PCR > 50次土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒
簡要描述:土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒及公司相關(guān)產(chǎn)品CTSC Others Human 人 CTSC / DPPI 人細(xì)胞裂解液 (陽性對照) 隱綠原酸(標(biāo)準(zhǔn)品)Cryptochlorogenic acid質(zhì)量規(guī)格:HPLC≥98%,標(biāo)準(zhǔn)品中國倉鼠卵巢細(xì)胞(亞系克隆);DUKXB11 carrying pDEF202-hTPO-P1鷹嘴豆芽素A(標(biāo)準(zhǔn)品)Biochanin A質(zhì)量規(guī)格:HPL
產(chǎn)品分類
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產(chǎn)品特點(diǎn):
◇高特異性:與其他病毒無交叉反應(yīng),無非特異性擴(kuò)增;
◇高靈敏度:檢測靈敏度可達(dá)10~100拷貝;
◇操作簡便:該系列所有試劑均采用相同的體系和條件,可同時進(jìn)行多個檢測;
◇高通量:多種雙重PCR檢測以及三重PCR檢測試劑盒。
產(chǎn)品名稱:土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒
產(chǎn)品規(guī)格: 50次
產(chǎn)品貨號:BK-P97078
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
原理是由一對引物介導(dǎo),能在動植物體外對特定基因(DNA)片斷進(jìn)行快速酶促擴(kuò)增,經(jīng)過n個熱循環(huán)擴(kuò)增,擴(kuò)增產(chǎn)物中所含特定基因數(shù)是原始模板數(shù)的(1+E)n(0<E<1,擴(kuò)增效率=倍,使得檢測擴(kuò)增產(chǎn)物中的特定基因成為可能。產(chǎn)品僅用于科研
特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
產(chǎn)品特點(diǎn):
1. 使用化學(xué)修飾的熱啟動聚合酶,反應(yīng)特異性高,*程度地避免了非特異擴(kuò)增;
2. 反應(yīng)緩沖液經(jīng)充分優(yōu)化,反應(yīng)靈敏快速,40個循環(huán)只需20多分鐘;
3. 抗干擾能力強(qiáng),反應(yīng)重復(fù)性高,適合對土壤、糞便、腫瘤和血液來源的復(fù)雜樣本中的靶基因進(jìn)行檢測分析。
在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,zui后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。
特異性熒光標(biāo)記:
TaqMan法
TaqMan探針的特性:
(1)5′端標(biāo)記有報告基團(tuán)(Reporter, R),如FAM、VIC等
(2)3′端標(biāo)記有熒光淬滅基團(tuán) (Quencher, Q)
(3)探針完整,R所發(fā)射的熒光能量被Q基團(tuán)吸收 ,無熒光, R與Q分開,發(fā)熒光
(4)Taq酶有 5′→3′外切核酸酶活性,可水解探針
相對定量通過內(nèi)標(biāo)定量:
內(nèi)標(biāo)(Endogenous Control)通常是β-actin、GAPDH基因等看家基因,在細(xì)胞中的表達(dá)量或在基因組中的拷貝數(shù)恒定,受環(huán)境因素影響小,內(nèi)標(biāo)定量結(jié)果代表了樣本中所含細(xì)胞或基因組數(shù)量。
實驗注意事項:
1)RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料,不同的樣本有不同要求,實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況;
2)客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號;
3)客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。
4)樣本保存于液氮或干冰,也可以保存于Trizol液中。
實時熒光定量PCR(quantitative real-time PCR,qPCR)是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團(tuán),利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進(jìn)程,最后通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進(jìn)行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類,探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴(kuò)增產(chǎn)物的增加,非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴(kuò)增的增加。運(yùn)用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進(jìn)行定量(包括絕對定量和相對定量)和定性分析。
主要服務(wù):DNA或RNA的絕對定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。
主要技術(shù):引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR。
PCR實驗步驟:
①取凍存已裂解的細(xì)胞,室溫放置5分鐘使其*溶解。
②兩相分離 每1ml的TRIZOL試劑裂解的樣品中加入0.2ml的lvfang,蓋緊管蓋。手動劇烈振蕩管體15秒后,15到30℃孵育2到3分鐘。4℃下12000rpm離心15分鐘。離心后混合液體將分為下層的紅色酚lvfang相,中間層以及無色水相上層。RNA全部被分配于水相中。水相上層的體積大約是勻漿時加入的TRIZOL試劑的60%。
③RNA沉淀 將水相上層轉(zhuǎn)移到一干凈無RNA酶的離心管中。加等體積異丙醇混合以沉淀其中的RNA,混勻后15到30℃孵育10分鐘后,于4℃下12000rpm 離心10分鐘。此時離心前不可見的RNA沉淀將在管底部和側(cè)壁上形成膠狀沉淀塊。
④RNA清洗 移去上清液,每1mlTRIZOL試劑裂解的樣品中加入至少1ml的75%乙醇(75%乙醇用DEPCH2O配制),清洗RNA沉淀?;靹蚝?,4℃下7000rpm離心5分鐘。
⑤RNA干燥 小心吸去大部分乙醇溶液,使RNA沉淀在室溫空氣中干燥5-10分鐘。
⑥溶解RNA沉淀 溶解RNA時,先加入無RNA酶的水40μl用槍反復(fù)吹打幾次,使其*溶解,獲得的RNA溶液保存于-80℃待用。 1)紫外吸收法測定先用稀釋用的TE溶液將分光光度計調(diào)零。然后取少量RNA溶液用TE稀釋(1:100)后,讀取其在分光光度計260nm和280nm處的吸收值,測定RNA溶液 濃度和純度。
透明質(zhì)酸,玻尿酸,醣醛酸(分子量90K) Hyaluronic Acid 分子式:(C14H21NO11)n 分子量:90K
土耳其紅油 Red oil 分子式: 分子量:
脫羰秋水仙堿 Demecolcine 分子式:C21H25NO5 分子量:371.43
肟菌酯 Trifloxystrobin 分子式:C20H19F3N2O4 分子量:408.37
無水溴化鋰(>98%,BR) Lithium bromide 分子式:LiBr 分子量:86.85
紅霉酮(特利霉素) Telithromycin 分子式:C43H65N5O10 分子量:812.00
環(huán)吡司胺; 環(huán)吡酮胺 Ciclopirox Olamine 分子式:C12H17NO2.C2H7NO 分子量:268.35
環(huán)丙沙星 Ciprofloxacin 分子式:C17H18FN3O3 分子量:331.34
磺胺二甲氧嗪; 磺胺二甲氧基嘧啶 Sulfadimethoxine 分子式: C12H14N4O4S 分子量:310.33
磺胺間二甲氧嘧啶鈉 Sulfadimethoxine sodium s 分子式:C12H13N4NaO4S 分子量:332.31
粘液素II,英文名或英文縮寫:Mucin,級別:BR,200u/mg,規(guī)格:1公斤 組蛋白脫乙?;?/span>9(HDAC9)活性比色法定量檢測試劑盒20次
姆沙伯 W NAWChromosorb W-NAW humaesistinELISAKit人抵抗素(Resistin)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
L-谷酸,英文名或英文縮寫:H-Glu(OMe)-OMe.HCl,級別:特純,98.0%,規(guī)格:5克 小鼠p53(p53)ELISA試劑盒 ,英文名: p53 ELISA Kit
芴甲氧羰基-L-天冬... Fmoc-Asp(OtBu)-OH (HPLC,≥98.0%) 71989-14-5 5G 通用試劑 大鼠基質(zhì)金屬蛋白酶4(MMP-4)ELISA檢測試劑盒Ratmaixmetalloproteinase4,MMP-4ELISAKit 96T/48T
亞鐵繞啉離子還原溶液 FqRROIN 14634-91-4 人FAM172A蛋白(FAM172A)免疫試劑盒 Human Protein FAM172A(FAM172A) ELISA kit
土拉熱弗朗西斯菌染料法熒光定量PCR試劑盒氧化鋁H,英文名或英文縮寫:Aluminum oxide H,級別:USP級,規(guī)格:250毫克 HumanCollagen-likeBioproteinⅡ,HCBⅡELISAKit人膠原蛋白Ⅱ(HCBⅡ)ELISA試劑盒規(guī)格:96T/48T
56-84-8L-天冬酸;L-天冬酸;L(+)天門冬酸;L(+)基丁二酸;L(+)基琥珀酸L-Aspartic acid;L-Asparaginic acid;L-AMinobutanedioic acid;L-AMinosuccinic acid 人腺相關(guān)病毒(
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