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土壤漆酶測試盒可見分光光度法

簡要描述:土壤漆酶測試盒可見分光光度法公司正在出售的產(chǎn)品:胰蛋白胨水 進口、國產(chǎn)Peptone Water Medium用于靛基質(zhì)試驗250Kovacs氏靛基質(zhì)試劑盒 進口、國產(chǎn)用于(靛基質(zhì))試驗配套試劑10ml*2ASS 瓊脂進口、國產(chǎn)Antibiotic sulfonamide sensitivity-test agar用于磺胺類靈敏度試驗(WHO方法)250AC肉湯進口、國產(chǎn)AC Broth用

  • 產(chǎn)品型號:
  • 廠商性質(zhì):經(jīng)銷商
  • 更新時間:2023-12-25
  • 訪  問  量:364

詳細介紹

商品介紹:

測定意義:

漆酶(Laccase)是一種含銅的多酚氧化酶,屬于銅藍氧化酶家族,廣泛分布于真菌和高等植物中,具有較強的氧化還原能力,在紙漿生物漂白,環(huán)境污染物降解和木質(zhì)纖維素降解以及生物檢測方面有非常廣泛的應(yīng)用。

測定原理

漆酶分解底物ABTS產(chǎn)生ABTS自由基,在420nm處的吸光系數(shù)遠大于底物ABTS,測定ABTS自由基的增加速率,可計算得漆酶活性。

自備實驗用品及儀器

天平、常溫離心機、可見分光光度計、1 mL玻璃比色皿、震蕩儀。

提取液:液體 100 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑一:液體 5 mL×1 瓶,4℃避光保存。

試劑二:液體 15 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑三:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

試劑四:液體 3 mL×1 瓶,4℃保存。

本試劑盒僅供研究使用公司實驗室提供免費代測,7個工作日出結(jié)果,提供原始數(shù)據(jù)!

產(chǎn)品名稱

規(guī)格

檢測方法

貨號

土壤漆酶測試盒可見分光光度法

50管/24樣

可見分光光度法

BK-01S6875

11.png 

實驗結(jié)果判斷我有妙招:

1、定量測定結(jié)果根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線計算樣品中待測物的含量。

2、以樣品孔的OD值大于陰性對照OD值+2~3SD,作為陽性結(jié)果的閾值。

3、以P/N值(陽性孔OD值/陰性孔OD值)大于或等于2.1為陽性,P/N值小于2.1,但大于1.5為可疑,P/N小于1.5為陰性。

4、ELISA試劑盒目測定性法:加入底物經(jīng)酶解和終止反應(yīng)后,肉眼觀察陽性孔顏色明顯深于(競爭法則淺于)陰性對照,與陰性對照的顏色接近者,判定為陰性。

與您分享常用不穩(wěn)定試劑的分類及要求:

① 易揮發(fā)、低燃點的試劑要密封,放于陰涼、通風(fēng)、遠離火源處保存。

② 與水蒸氣,水發(fā)生反應(yīng)的物質(zhì)要密封,并遠離水源保存。

③ 易與氧氣作用的試劑,應(yīng)將其固體或晶體密封保存,不宜長期存放其水溶液,亞硫酸,氫硫酸溶液要密封存放,鉀,鈉,白磷更要采用液封形式。

④ 與二氧化碳反應(yīng)的物質(zhì)要密封保存,其相應(yīng)的溶液較固體更易反應(yīng),所以更要注意密封保存。

⑤ 易揮發(fā)或自身分解的試劑要密封,放于陰涼通風(fēng)處保存。

操作步驟:

1. 樣品的準(zhǔn)備:

a. 細胞樣品的準(zhǔn)備:收集細胞,用4 ℃或冰浴預(yù)冷的PBS 或生理鹽水洗滌1-2遍。沉淀用預(yù)冷組織細胞裂解液4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4℃離心,取上清作為待測樣品。

b. 組織樣品的準(zhǔn)備:動物用生理鹽水(0.9% NaCl ,含有0.16mg/ml) 灌流清除血液后獲取組織樣品。按照每100mg加入500-1000ul組織細胞裂解液比例, 4 ℃或冰浴勻漿( 可以使用玻璃勻漿器或各類常見電動勻漿器) 。隨后勻漿液4 ℃離心,取上清作為待測樣品。

d. 使用BCA蛋白濃度測定試劑盒(P1511)測定蛋白濃度。通常10-20ug蛋白的細胞或組織勻漿液樣品中SOD平均活力約1個活力單位左右(不同細胞和組織的差異會比較大,該活力范圍僅作為初步的參考) 。每種樣品準(zhǔn)備20-100 ug蛋白量通常已經(jīng)足夠用于后續(xù)檢測。

e. 根據(jù)蛋白濃度和預(yù)計的蛋白使用量,用試劑盒提供的SOD檢測緩沖液適當(dāng)稀釋樣品。例如,小鼠肝臟通常需要稀釋10-100 倍。準(zhǔn)備好的樣品如果當(dāng)天測定,可以冰浴保存;如果當(dāng)天不能完成測定,可以-70 ℃凍存,但建議盡量當(dāng)天完成測定。

2. 試劑盒的準(zhǔn)備工作:

a. WST-8酶工作液的配制: 參照下表,根據(jù)待檢測樣品(包括標(biāo)準(zhǔn)品) 數(shù)量,配制適量WST-8酶工作液,配制好的WST-8酶工作液4 ℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

注意:由于酶溶液的用量較少且易沉降,必須注意在使用前先輕輕離心一下,然后適當(dāng)混勻后再使用。

b. 反應(yīng)啟動工作液配制:將試劑盒提供的反應(yīng)啟動液 (40X) 溶解后混勻,按1μl 反應(yīng)啟動液(40X) 加入39μl SOD 檢測緩沖液的比例進行稀釋,即為反應(yīng)啟動工作液。4℃或冰浴保存,可當(dāng)天使用,但建議盡量現(xiàn)配現(xiàn)用。

c. (可選做) SOD 標(biāo)準(zhǔn)品準(zhǔn)備:需自備SOD標(biāo)準(zhǔn)品,用本試劑盒提供的稀釋液將SOD標(biāo)準(zhǔn)品稀釋至如下系列濃度:20U/ml,10U/ml ,5U/ml,2.5U/ml,1.25U/ml,0.625U/ml。在隨后的檢測中可以各取20微升,參考樣品進行檢測。說明:為避免稀釋后SOD酶活性的下降, SOD標(biāo)準(zhǔn)品宜現(xiàn)稀釋現(xiàn)使用;本試劑盒對于SOD的檢測并不需要SOD作為標(biāo)準(zhǔn)品,但可以使用SOD標(biāo)準(zhǔn)品作為陽性對照或作為對SOD活性定量的參考。

250mL RNase-Free Tris-HCl Solution(無RNase的Tris-HCl溶液),1M,pH8.0   RNase-Free Tris-HCl Solution,1M,pH8.0   常溫保存

100mL RNase-free Tris HCl,1M,pH 6.5  常溫

2 ug pDC311 pDC311 低溫運輸,-20℃保存

皰肉基礎(chǔ) Cooked Meat Medium Base 250g

1g 魚藤酮 Rotenone 室溫避光保存

50T 兔黏液瘤病毒PCR檢測試劑盒  低溫運輸,-20℃保存

2 g Sodium orthovanadate (酯抑制劑) Cell Apoptosis Inducer and Inhibitor -20℃保存

250mL Glucose Solution(葡萄糖溶液),20%(W/V) Glucose Solution,20%(W/V) 常溫保存

1個 暗盒(5×7英寸) Cassette 室溫

500mL Blotto-Tween in TBS   Blotto-Tween in TBS   常溫保存

季銨鹽類中和劑管(帶棉簽)  10ml*20

土壤漆酶測試盒可見分光光度法USP9X  泛素特異性蛋白9X抗體 規(guī)格: 0.2ml

AUP1/Ancient ubiquitous protein 1  原始廣泛存在蛋白1抗體 規(guī)格: 0.2ml

Insulin Receptor/CD220  胰島素受體抗體 規(guī)格: 0.1ml

Elastin  彈性蛋白α抗體 規(guī)格: 0.1ml

SEZ6L  癲癇樣相關(guān)蛋白6抗體 規(guī)格: 0.2ml

Destrin 19/ADF  肌動蛋白解聚因子19抗體 規(guī)格: 0.1ml

ECE2  內(nèi)皮素轉(zhuǎn)化2抗體 規(guī)格: 0.1ml

ADCK4  ADCK4蛋白抗體 規(guī)格: 0.2ml

MLN/Motilin  胃動素抗體 規(guī)格: 0.1ml

GSK-3 Beta (CT)  葡萄糖合成激-3β抗體 規(guī)格: 0.1ml

Collagen I  Ⅰ型膠原抗體 規(guī)格: 0.1ml

C17orf64  17號染色體開放閱讀框64抗體 規(guī)格: 0.2ml

 


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